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臨床微生物標本采集與轉運系統的現狀與展望
標本的采集及轉運是臨床微生物實(shí)驗室分析前檢驗的一個(gè)重要的組成部分，正確的采集及轉運系統直接關(guān)系到致病菌培養的陽(yáng)性率及正確率的高低，是臨床微生物檢驗成功的關(guān)鍵。下面是yjbys小編為大家帶來(lái)的臨床微生物標本采集與轉運系統的現狀與展望的知識，歡迎閱讀。
一、我國臨床微生物分析前檢驗現狀
目前，我國臨床微生物檢驗分析前檢驗領(lǐng)域還存在不少問(wèn)題，如很多醫院都存在標本采集方式不正確、運送時(shí)間過(guò)長(cháng)和儲存溫度不適宜等情況。近年來(lái)，隨著(zhù)臨床微生物學(xué)者們的呼吁和相關(guān)學(xué)術(shù)討論的深入，臨床微生物分析前檢驗的重要性已經(jīng)逐漸被醫學(xué)同行們所認可。目前我國臨床微生物學(xué)分析前檢驗的關(guān)注點(diǎn)主要集中于檢驗標本是否合格、有無(wú)進(jìn)行不合格標本的退檢及與臨床的溝通等，而影響臨床微生物檢驗結果的一個(gè)重要因素———標本轉送容器的質(zhì)量卻很少受到關(guān)注。
與臨床生物化學(xué)、臨床免疫學(xué)和臨床血液學(xué)檢驗相比，臨床微生物檢驗標本類(lèi)型復雜，故轉運容器的制作與標準化也要復雜得多。臨床生物化學(xué)、臨床免疫學(xué)和臨床血液學(xué)檢驗以血標本為主，相關(guān)的標準化采血管的制作也已成熟并應用于臨床，對提高檢驗結果質(zhì)量以及結果的標準化具有重要意義。臨床微生物檢驗標本類(lèi)型具有多樣性，有固體(如組織)、半固體(如糞便)和不同黏度的流體(如痰、膿、抽吸物、血液和尿液等)。因此，相應的存放樣本的容器形狀和大小也具有多樣性�；旧�，在我國臨床微生物檢驗實(shí)際應用的標本轉運容器中，除了血培養瓶得到標準化和規范之外，其他類(lèi)型的標本采集和轉送系統或多或少都存在一些問(wèn)題，如轉運容器密封性不夠、未達到無(wú)菌要求和容易出現泄露等，極大地影響了臨床微生物檢驗的質(zhì)量。
由于不同標本黏稠度差異較大，臨床操作與相應的處理就比較困難。近年來(lái)這一難題已有所突破，通過(guò)液基微生物學(xué)將各種類(lèi)型的微生物標本轉化為溶液，可以實(shí)現臨床各種標本的標準化，相關(guān)產(chǎn)品也不斷問(wèn)世。而國內對臨床微生物標本采集拭子和運輸系統的質(zhì)量以及采集效率的關(guān)注很少，目前所采用的標本采集及運輸的工具較簡(jiǎn)單，多為傳統的纖維拭子、普通的塑料無(wú)菌容器等，不能保證病原菌在運送過(guò)程中的活力，嚴重影響了臨床微生物檢驗的質(zhì)量。特別是現在越來(lái)越多的醫院開(kāi)始使用自動(dòng)化的氣動(dòng)物流標本傳輸系統，轉運容器密封性差，經(jīng)常出現標本泄露，嚴重影響檢驗質(zhì)量，檢驗人員也日益意識到標本轉運系統質(zhì)量的重要性。同時(shí)，臨床微生物檢驗一個(gè)重要的發(fā)展方向是自動(dòng)化，而目前五花八門(mén)的轉運容器無(wú)法適應這一發(fā)展趨勢。因此，現代檢驗的氣動(dòng)物流標本運輸系統及臨床微生物檢驗全自動(dòng)化發(fā)展方向均呼吁臨床微生物檢驗領(lǐng)域采用高質(zhì)量的標本采集與轉運系統。
二、新型標本采集及轉運系統
1. 尿液標本采集與轉運系統：目前應用較多新型的尿液轉運系統主要為Uriswab尿液收集系統以及Vacutainer Plus Urine C&S Preservative Tubes。Uriswab尿液收集系統是主要由海綿拭子組成，海綿中含有硼酸和甲酸鈉的聚合物，接觸到尿液會(huì )進(jìn)行活化，可減少運輸過(guò)程中出現菌群過(guò)度生長(cháng)或過(guò)度死亡的現象。此系統操作簡(jiǎn)單，安全且無(wú)泄漏，在冷藏或室內溫度下保持細菌生存力可達48 h。另一種新型的尿液采集轉運系統為Vacutainer Plus Urine C&S Preservative Tubes，它自帶凍干粉保存劑(硼酸緩沖液、甲酸鈉和硼酸鈉)，可使尿液在非冷藏條件下儲存48 h。
2. 痰標本采集與轉運系統：痰標本采集與轉運系統制作最大的難點(diǎn)為痰標本具有明顯的非均質(zhì)性，細菌等成分的分布濃度很不均勻，故痰液稀釋在微生物分離培養中有重要意義。傳統的胰酶預處理痰液的方法，耗時(shí)較長(cháng)，應用液在常溫下不易保存，且反復凍融容易失效，往往需現配現用。a-糜蛋白酶溶液消化所需時(shí)間更短，但成本較高。新型的痰標本采集與轉運系統采用的是SL solution來(lái)進(jìn)行痰標本液化，其有效成分是二硫蘇糖醇(dithiothreitol, DTT)，其溶解痰液的溶劑裝在無(wú)菌塑料管里，無(wú)須再進(jìn)行水化，且其在室溫下穩定，保質(zhì)期長(cháng)，可以隨取隨用，方便檢驗人員的臨床操作。
3. 糞便標本采集與轉運系統：FecalSwab是一種采集、運輸、儲存便樣的轉運系統，其配方是為保持腸桿菌科細菌的生存力而特別設計。其專(zhuān)門(mén)設計的植絨拭子，可以精準地采集標本。用途較廣，樣本可以直接在血培養皿上進(jìn)行畫(huà)線(xiàn)或者分離，也可以分為等份試樣后轉移至選擇性增菌培養液中再進(jìn)行操作，可用于PCR。有研究表明，FecalSwab在保持糞便中病原體活力方面較Eswab及其他常用的轉運系統(如干燥容器及Amies凝膠拭子)有明顯優(yōu)勢。
4. 細胞及核酸標本采集與轉運系統：Cymol是一種用于細胞及核酸的運輸和儲存的轉運系統。三種酒精混合液有利于標本的保存，并可抑制普通菌群過(guò)度生長(cháng)�；|(zhì)可保持核酸的穩定性，可通過(guò)基于RNA與DNA的分子核酸檢測，檢測人乳頭瘤病毒、衣原體和淋病奈瑟菌。Enat是一種為分子生物應用而設計的運送核酸的系統，配方中加入了去污劑，保證樣本達到穩定狀態(tài)。還可對傳染性病原體進(jìn)行滅活，降低檢驗人員接觸未知病毒的風(fēng)險。
5. 病毒標本采集與轉運系統：新型通用病毒采集運輸系統可用于病毒、支原體、衣原體及脲原體的采集運輸�？稍谑覝鼗虮�(2-25 ℃)儲存病原體至少48 h。含有低溫防護劑用于病毒及支原體在冰上的保存，基質(zhì)內含抑制細菌及真菌生長(cháng)的抗菌藥物以防止污染。
6. 其他轉運系統：2005年研發(fā)的Eswab拭子，是目前微生物技術(shù)較先進(jìn)的運輸系統，它能在室溫和冰箱溫度下保持需氧菌、厭氧菌和苛養菌生存力長(cháng)達48 h，是一種多用途液基采集儲存系統。Eswab由一個(gè)植絨拭子和一個(gè)1 ml的Amies液體管組成使樣本采集過(guò)程的損傷變得更低，并且能收集更多的樣本，立即洗脫進(jìn)液相中以進(jìn)一步多重分析。有學(xué)者報道：Eswab中病原菌的復蘇率是其他轉運系統(MaxV和Remel BactiSwab)的十倍以上。
三、不同標本采集與轉運系統比較研究
目前，關(guān)于不同標本采集與轉運系統的比較研究，只有來(lái)自國外學(xué)者的研究資料。不同的病原菌、轉運溫度及轉運時(shí)間對于轉運系統的要求也有所不同。用無(wú)炭的Amies瓊脂凝膠轉運金黃色葡萄球菌，細菌活力最長(cháng)可達18 d;Gladstone等對105篇文章做出的Meta分析顯示：對于肺炎鏈球菌的轉運，尼龍植絨拭子在標本的吸收和釋放方面有較好作用;而在轉運介質(zhì)方面，WHO推薦的牛奶、胰蛋白胨、葡萄糖、甘油組成的介質(zhì)(STGG)比只有牛奶，葡萄糖及甘油組成的介質(zhì)(SGG)有較高的復蘇率。在對于厭氧菌的轉運過(guò)程中，采用Eswab轉運的標本，其細菌的復活率都明顯高于MaxV系統和RBS系統。Hirvonen和Kaukoranta對12株ATCC標準菌株及328株臨床糞便標本的研究發(fā)現：Eswab和FecalSwab優(yōu)于傳統的標本轉送系統(Amies gel swabs和dry containers)，Eswab更適合糞便標本的采集與轉送，但FecalSwab在不同溫度的標本保存方面具有較明顯的優(yōu)勢。
在不同的環(huán)境下宜選擇不同的轉運系統。有研究發(fā)現同是針對厭氧菌的Port-A-Cul轉運系統
與COMP傳統轉運系統，在4℃時(shí)，兩者在保持細菌活力方面都具有較好的作用;而在室溫下，Port-A-Cul轉運系統就比COMP傳統的轉運系統有明顯優(yōu)勢。當樣品不能得到及時(shí)的處理或冷藏時(shí)，ETA比Amies和Stuarts培養基有較明顯優(yōu)勢。
四、標本采集與轉運系統在多重耐藥菌株分離中的應用
新型的轉運系統對于多重耐藥(Multidrug resistance, MDR)菌株的分離有重要的意義。有研究表明，Eswab在轉移多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌時(shí)，其在0、1、24和48 h的復活率均明顯高于普通的標準轉運系統(standard swab system, SSS)2倍以上。即使是在轉運時(shí)間延長(cháng)或者接種液較少的情況下，Eswab轉運的標本，其病原體仍然能保持較高的復活率。在冰凍的情況下，接種可至少延遲2周。Lerner等學(xué)者成功將Eswab轉運系統用于碳青霉烯耐藥腸桿菌科細菌(carbapenem-ressistant Enterobacteriaceae, CRE)的分離培養，取得了較好的效果。Smismans等將Eswab轉運系統應用于MRSA菌株的分離，并取得了Venturi swab轉運系統3.6倍的標本采集與復蘇效率�？梢�(jiàn)，新型標本采集與運送系統在多重耐藥的分離中也發(fā)揮著(zhù)重要作用。
五、標本采集與轉運系統的未來(lái)發(fā)展展望
近年來(lái)，微生物檢驗的標準化和自動(dòng)化已成為各個(gè)實(shí)驗室的發(fā)展方向。自動(dòng)化的檢驗能夠提高檢驗質(zhì)量，提高檢驗效率，減少人為誤差，并能夠節省人力，提高生物安全性等。采用方便、快捷、高性能的標本轉運系統在自動(dòng)化的進(jìn)程有重要意義。標本采集與運送系統領(lǐng)域未來(lái)的發(fā)展與研究將集中于：(1)進(jìn)一步立足臨床需求，開(kāi)發(fā)與完善臨床微生物標本采集與轉運系統，提升臨床微生物檢驗質(zhì)量;(2)進(jìn)一步評估不同標本采集與轉運系統在不同目標病原菌、不同標本運送溫度和不同儲存溫度下的差異，以根據實(shí)際情況合理選擇適合所在實(shí)驗室的轉運系統;(3)研究不同標本采集與轉運系統在感染控制中的應用，特別是多重耐藥菌的分離。
我國臨床微生物學(xué)家對微生物標本采集與轉運系統加強了重視，各個(gè)醫院也都意識到標本采集與轉運系統的重要性，制定了微生物標本采集手冊與轉運系統相關(guān)的操作指南。目前，制約標本轉運系統的發(fā)展的一個(gè)重要因素為臨床微生物檢驗的收費問(wèn)題。國內的微生物檢驗成本較高，收費較低，缺乏資金使得微生物實(shí)驗室在改進(jìn)標本采集和轉運系統的過(guò)程中舉步維艱。筆者建議在目前的收費系統中增加單收材料費，這有利于臨床微生物檢驗質(zhì)量的提升。希望本文的介紹可以推動(dòng)各種新型轉運系統在我國臨床微生物檢驗領(lǐng)域的應用，進(jìn)一步提升臨床微生物檢驗的質(zhì)量，促進(jìn)微生物檢驗標準化及自動(dòng)化的發(fā)展。同時(shí)，也希望中國臨床微生物學(xué)者積極關(guān)注新型標本采集與轉運系統，進(jìn)行臨床研究、評估與應用，并總結相關(guān)經(jīng)驗與資料，向國際同行展示來(lái)自中國的循證臨床微生物學(xué)資料，提升中國臨床微生物界在國際上的影響力!
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