微生物檢測操作工個(gè)人工作總結

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　　自從本人接管微生物實(shí)驗室以來(lái),發(fā)生過(guò)大大小小的實(shí)驗室偏差,現在就各類(lèi)偏差現象談?wù)剛�(gè)人看法:

　　由于微生物的特殊性,微生物檢測異常結果的調查與評價(jià)較理化檢測更為復雜和困難,因為

　　1樣品在環(huán)境中的均一性較差(即 分布不均)

　　2微生物的不穩定性--因為藥品檢驗的對象是具有繁殖能力的活細胞生物,其能因存放時(shí)間的延長(cháng)而死亡亦或大量繁殖

　　3檢驗周期長(cháng)--需待其形成肉眼可見(jiàn)的菌落,一般需72小時(shí)

　　4檢驗過(guò)程中影響因素較多,如微生物的生理狀態(tài),樣品的抑菌性,培養基靈敏度,培養溫度

　　所以,盡管我們執行檢驗規程和sop,在實(shí)際操作中也難免會(huì )有實(shí)驗室偏差,因此微生物實(shí)驗室有必要制定適當的偏差處理方法,

　　個(gè)人認為:對于微生物實(shí)驗室偏差,檢驗員應端正心態(tài),以科學(xué)嚴謹的態(tài)度去面對,切勿隱瞞(特別是超標偏差), 當出現偏差,當事檢驗員應有清晰的分析思路:從一切可能的角度去調查,從而有針對性的去處理偏差,得出正確的實(shí)驗結果..實(shí)驗室負責人應在接到異�；虺瑯私Y果的報告后,及時(shí)向部門(mén)經(jīng)理匯報情況,

　　然后按以下步驟進(jìn)行調查分析偏差原因并作出適當處理,

　　1檢查所有的 玻璃儀器,工具,溶液,樣品是否正確

　　微生物限度檢驗所用玻璃儀器,稀釋劑:極少會(huì )出現染菌現象, 因為其滅菌規程成熟且簡(jiǎn)便,一般可對其進(jìn)行徹底滅菌,若還是出現問(wèn)題,則可能是設備性能不達標或保存過(guò)程中受到污染了.

　　另:如研缽等能用干熱滅菌的器皿則盡量用干熱法滅菌,因為濕熱法滅菌后的物品會(huì )因帶有水蒸氣--冷凝而成少量水附著(zhù)于物品表面和內壁,若不及時(shí)將其烘干,則易滋生微生物造成不必要的污染,

　　2與檢驗員討論檢驗方法,確認無(wú)方法和操作方面的問(wèn)題

　　微生物限度檢查中制備供試液所用到的乳化劑,分散劑有聚山梨酯80,十四烷酸異丙脂,其能將一些非水溶性的供試品(硬脂酸鎂)在稀釋劑里充分混勻,達到"供試液均勻一致"的效果,使被檢樣品更具代表性,為了便于觀(guān)察某些細菌,在細菌檢查培養基中還可加入一顯色劑,如TTC,其最終濃度為0.001%,若過(guò)高則會(huì )對細菌的生長(cháng)有抑制作用

　　在檢查抗菌藥物時(shí),可以在供試液制備過(guò)程中(或在培養基里)加入中和劑,其用量應在方法驗證過(guò)程中確定.

　　例1:在檢查青霉素類(lèi)藥物如 阿莫西林膠囊時(shí),則可在稀釋劑或培養基中加入青霉素酶,其能完全特異,迅速的使青霉素滅活,,從而使青霉素失去抑菌,殺菌的作用.

　　例2:在檢查喹諾**類(lèi)抗菌藥時(shí),可根據其理化性質(zhì):3,4位羧基與**羰基,容易和金屬離子如,鈣,鎂,鐵,鋅等形成螯合物降低藥物的活性.在稀釋劑或培養基中加入MnSO4(0.1mol/L)

　　3檢查在相關(guān)時(shí)間段其他樣品或同類(lèi)樣品的檢測結果 和 微生物菌落形態(tài)

　　也可參考當天/當次檢驗其他檢品的檢驗結果,有類(lèi)似異常情況發(fā)生,可根據所檢查微生物菌落形態(tài)作出相應的判斷.微生物在液體培養基(如營(yíng)養肉湯,改良馬丁培養基)中的培養特征會(huì )有:形成菌膜/形成沉淀/渾濁,在固體培養基(營(yíng)養瓊脂,玫瑰紅鈉瓊脂)上的形態(tài)有:菌落表面形態(tài)—圓形,根狀,不規則形,菌落隆起形狀—隆起,扁平,凸起,臍狀凸起,菌落邊緣形狀—邊緣整齊,裂葉狀,波狀,絲狀,鋸齒狀,

　　舉例:金黃色葡萄球菌,在營(yíng)養瓊脂平板上,經(jīng)37度培養24-48小時(shí)后,產(chǎn)生金黃色脂溶性色素,呈金黃色,菌落較小,,直徑多在0.8-1.5mm之間,圓形,凸起,邊緣整齊,表面光滑,濕潤,不透明之菌落.

　　4潔凈室潔凈度的控制

　　為了維護醫藥實(shí)驗用潔凈室環(huán)境的穩定性,確保實(shí)驗結果的準確性,對潔凈室環(huán)境質(zhì)量應采取合理的控制措施和評價(jià)方法是非常重要的無(wú)菌技術(shù)主要指在微生物實(shí)驗工作中,控制或防止各類(lèi)微生物的污染及其干擾的一系列操作方法和有關(guān)措施,其中包括無(wú)菌環(huán)境設施無(wú)菌實(shí)驗器材以及無(wú)菌操作等,無(wú)菌環(huán)境是指人們用物理的或化學(xué)的方法,在某一可控的空間內使微生物數量降低到最低限度,接近于無(wú)菌的一種空間,醫藥企業(yè)中，消毒與滅菌是微生物實(shí)驗技術(shù)中最基本的操作，消毒是指對病原微生物的繁殖體的致死作用，但不能殺死芽孢等全部微生物.所以,消毒是不徹底的,不能代替滅菌.凡用于消毒的化學(xué)藥品稱(chēng)為消毒劑,其有液體的,固體的,和氣體的，消毒劑種類(lèi)很多,性質(zhì)不一,因此應根據具體情況選擇既安全又有效的消毒劑.關(guān)于消毒劑的類(lèi)型于影響因素詳見(jiàn) 本人的PPT資料<消毒劑>.

　　無(wú)菌操作一般是指在無(wú)菌環(huán)境條件下,使用無(wú)菌制品或無(wú)菌器材進(jìn)行檢驗或實(shí)驗的過(guò)程中,能防止微生物污染與干擾的一種常規操作方法,其目的有一是保證待檢驗物不被環(huán)境中的微生物污染,二防止被檢微生物在操作中污染環(huán)境或感染操作人員,個(gè)人認為:藥品微生物限度檢驗無(wú)菌操作,應遵循"有菌觀(guān)念,無(wú)菌操作"的原則,嚴格按SOP進(jìn)行各項無(wú)菌操作,詳見(jiàn)<藥品微生物檢驗學(xué)手冊>308頁(yè), :檢驗員應在無(wú)菌操作的基礎上,盡量提高操作的準確性,進(jìn)一不提高檢驗結果的準確性

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