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毛鉤藤葉對中樞抑制作用的初步研究
鉤藤是中醫臨床治療肝風(fēng)內動(dòng)，驚癇抽搐的常用中藥，下面是小編搜集的一篇關(guān)于毛鉤藤葉對中樞抑制作用探究的論文范文，歡迎前來(lái)閱讀借鑒。
【摘要】 目的研究毛鉤藤葉對中樞神經(jīng)系統的藥理作用。方法采用小動(dòng)物自主活動(dòng)測定儀測定小鼠的自主活動(dòng)。采用戊巴比妥鈉閾下催眠實(shí)驗及戊巴比妥鈉閾劑量誘導小鼠睡眠時(shí)間實(shí)驗，觀(guān)察毛鉤藤葉的鎮靜催眠作用。結果鉤藤組(12 g/kg)與毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3個(gè)劑量組均能使小鼠自發(fā)活動(dòng)減少，使戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量致小鼠入睡個(gè)數增多，并延長(cháng)戊巴比妥鈉閾劑量睡眠時(shí)間，且以毛鉤藤葉高劑量組效果最為明顯。結論毛鉤藤葉具有顯著(zhù)的中樞抑制作用。
【關(guān)鍵詞】 鉤藤; 毛鉤藤葉; 自主活動(dòng); 催眠作用
鉤藤具有清熱平肝、息風(fēng)定驚之功效，是中醫臨床治療肝風(fēng)內動(dòng)，驚癇抽搐的常用中藥。2005年版《中國藥典》規定中藥鉤藤為茜草科植物鉤藤Uncaria rhyuchophylla ( Miq. ) Jacks.，華鉤藤U. siueusis (Oliv. ) Havil.，大葉鉤藤U . macrophylla Wall.，毛鉤藤U. hirsute Havil.，無(wú)柄果鉤藤U. sessillfructus Roxb.的干燥帶鉤莖枝[1]。鉤藤中含有多種吲哚類(lèi)生物堿,主要有鉤藤堿,異鉤藤堿[2～4]。最近的研究發(fā)現鉤藤葉中也含有鉤藤堿和異鉤藤堿[5～6]。目前對鉤藤的研究多集中于該植物帶鉤的莖枝，而對于該植物的其他部位研究報道較少。為開(kāi)發(fā)和利用鉤藤葉資源，本文對毛鉤藤葉的中樞神經(jīng)系統作用進(jìn)行初步的藥理學(xué)研究。
1 材料與儀器
1.1 藥材 毛鉤藤嫩枝采自本校中藥圃，經(jīng)本校中藥鑒定教研室張宏偉副教授鑒定為茜草科植物毛鉤藤Uncaria hirsute Havil.。將毛鉤藤葉與帶鉤莖枝分別剪下，在60℃以下烘干，將兩種藥材分別用75%乙醇回流提取兩次，回收乙醇后，減壓濃縮制成1∶1(1g/ml)醇提取液。放入4℃冰箱中保存備用，使用前用蒸餾水配置成所需濃度。
戊巴比妥鈉由中國醫藥集團上�；瘜W(xué)試劑公司生產(chǎn)，批號F20050405。95%乙醇、無(wú)水乙醇等試劑由廣東汕頭西隴化工廠(chǎng)生產(chǎn)。
1.2 動(dòng)物 SPF級昆明種小鼠, 雌雄各半, 體重20～25 g, 由南方醫科大學(xué)實(shí)驗動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號: SCXK粵2006-0015。
1.3 儀器 YLS-1A多功能小動(dòng)物自主活動(dòng)記錄儀，山東省醫學(xué)科學(xué)院設備站提供。
2 方法
2.1 小鼠自發(fā)活動(dòng)實(shí)驗[7] 昆明種小鼠50只，雌雄各半，禁食12 h，飲水不限。將小鼠隨機分為5組，即空白對照組(等容量生理鹽水組)，鉤藤(即毛鉤藤帶鉤莖枝，下同)組(12 g/kg)和毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3劑量組。每組10只動(dòng)物。將各組小鼠放入YLS-1A多功能小動(dòng)物自主活動(dòng)記錄儀中, 適應5 min后，測定小鼠給藥前的自主活動(dòng)次數, 記錄時(shí)間為5 min。記錄時(shí)室內保持安靜。然后按劑量給各組小鼠灌胃給藥(ig)。分別于給藥后30，60 min各測定1次自發(fā)活動(dòng)數，記錄5min內各組小鼠的活動(dòng)數。
2.2 戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量誘導小鼠入睡實(shí)驗[8] 取昆明種小鼠50只，雌雄各半。將小鼠隨機分為5組，即空白對照組(等容量生理鹽水組)，鉤藤組(12 g/kg)和毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3劑量組。按各組劑量給小鼠ig給藥， 藥后60 min后給每只小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉30 mg/kg，以小鼠翻正反射消失1 min以上為入睡標準，記錄15 min內各組小鼠的入睡個(gè)數。
2.3 戊巴比妥鈉閾劑量誘導小鼠睡眠時(shí)間實(shí)驗[8] 取昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組。將小鼠隨機分為5組，即空白對照組(等容量生理鹽水組)，鉤藤組(12 g/kg)和毛鉤藤葉低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3劑量組。按各組劑量給小鼠ig給藥，藥后60 min后給每只小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉50 mg/kg，然后記錄各組小鼠的睡眠時(shí)間(以給藥后小鼠翻正反射消失為入睡時(shí)間，翻正反射消失至恢復為睡眠時(shí)間)。
2.4 統計學(xué)處理 實(shí)驗數據以±s表示，應用SPSS 13.0統計軟件進(jìn)行完全隨機設計資料的單因素方差分析或兩獨立樣本t檢驗，組間多重比較方差齊時(shí)用LSD方法，不齊時(shí)用Games- Howell方法。P<0.05表示差異有統計學(xué)意義。計數資料采用χ2檢驗。
3 結果
3.1 藥物對小鼠自發(fā)活動(dòng)的影響由表1可見(jiàn)，空白對照組給藥前后小鼠自發(fā)活動(dòng)次數未見(jiàn)明顯變化(P>0.05)。鉤藤組和毛鉤藤葉低、中、高3個(gè)劑量組給藥后小鼠的自發(fā)活動(dòng)明顯減少，與給藥前相比，均有顯著(zhù)性差異(P<0.05或P<0.01)。鉤藤組和毛鉤藤葉中、高劑量組給藥后小鼠的自發(fā)活動(dòng)次數與空白對照組相比，均有非常顯著(zhù)差異(P<0.01)。毛鉤藤葉對小鼠自發(fā)活動(dòng)的抑制隨劑量加大而加強，毛鉤藤葉高劑量組與鉤藤組比較差異非常顯著(zhù)(P<0.01)。表1 各組小鼠自發(fā)活動(dòng)次數與空白組比較，*P<0.01;與給藥前比較，△P<0.05，△△P<0.01;與鉤藤組比較，▲P<0.01;n=10
3.2 藥物對戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量致小鼠入睡的影響 結果表明，空白組腹腔注射戊巴比妥鈉30 mg/kg后小鼠無(wú)一睡眠。鉤藤組和毛鉤藤葉低、中、高3個(gè)劑量組均有小鼠入睡，各組小鼠入睡個(gè)數經(jīng)χ2檢驗表明，χ2=16.586，ν=4，P=0.002(雙側)，差異有顯著(zhù)性意義，可認為5個(gè)實(shí)驗組之間的差異有顯著(zhù)性意義，其中毛鉤藤葉高劑量組小鼠的入睡個(gè)數最多。見(jiàn)表2～3。表2 戊巴比妥鈉閾下劑量誘導睡眠的結果表3 戊巴比妥鈉閾下劑量誘導睡眠的統計結果
3.3 毛鉤藤葉對戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的影響 由表4可見(jiàn)，鉤藤及毛鉤藤葉給藥后可使戊巴比妥鈉閾劑量所致小鼠睡眠時(shí)間延長(cháng)，鉤藤組及毛鉤藤葉低劑量組可使睡眠時(shí)間延長(cháng)，但與空白組比較無(wú)顯著(zhù)性差異(P>0.05)。毛鉤藤葉中、高劑量組與空白組比較均有顯著(zhù)差異(P<0.05或P<0.01)。毛鉤藤葉3個(gè)劑量組的小鼠睡眠時(shí)間隨劑量加大而延長(cháng)。毛鉤藤葉高劑量組與鉤藤組比較差異非常顯著(zhù)(P<0.01)。表4 藥物對戊巴比妥鈉閾劑量睡眠時(shí)間的影響
4 討論
本研究主要考察毛鉤藤葉對中樞神經(jīng)系統的抑制作用。采用了小鼠自發(fā)活動(dòng)實(shí)驗、戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量誘導小鼠入睡實(shí)驗及戊巴比妥鈉閾劑量誘導小鼠睡眠時(shí)間實(shí)驗來(lái)評價(jià)毛鉤藤葉的鎮靜催眠作用，并與毛鉤藤帶鉤莖枝進(jìn)行對比。從實(shí)驗結果可知，毛鉤藤葉低、中、高3個(gè)劑量組給藥后小鼠的自發(fā)活動(dòng)明顯減少，鉤藤組和毛鉤藤葉中、高劑量組與空白組相比，差異非常顯著(zhù)。毛鉤藤葉對小鼠自發(fā)活動(dòng)的抑制隨劑量加大而加強，毛鉤藤葉高劑量組與鉤藤組比較有差異，表明毛鉤藤葉的鎮靜作用比鉤藤莖枝明顯。毛鉤藤葉高劑量組還能明顯增加戊巴比妥鈉閾下睡眠劑量誘導入睡的小鼠個(gè)數，并能明顯延長(cháng)戊巴比妥鈉閾劑量的小鼠睡眠時(shí)間，與鉤藤組相比較有差異。提示高劑量的毛鉤藤葉對中樞的抑制作用較為顯著(zhù)。
實(shí)驗結果表明毛鉤藤葉具有明顯的鎮靜催眠作用，其作用強度與劑量有一定關(guān)系。但毛鉤藤葉抑制中樞神經(jīng)系統的物質(zhì)基礎及作用機理仍有待深入研究。
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