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臨床執業(yè)醫師助理考點(diǎn):革蘭氏染色法概述
細菌先經(jīng)堿性染料結晶紫染色,而經(jīng)碘液媒染后,用酒精脫色,在一定條件下有的細菌紫色不被脫去,有的可被脫去,因此可把細菌分為兩大類(lèi),前者叫做革蘭氏陽(yáng)性菌(G+),后者為革蘭氏陰性菌(G-)。為觀(guān)察方便,脫色后再用一種紅色染料如堿性蕃紅、稀釋復紅等進(jìn)行復染。陽(yáng)性菌仍帶紫色,陰性菌則被染上紅色。有芽胞的桿菌和絕大多數的球菌,以及所有的放線(xiàn)菌和真菌都呈革蘭氏正反應;弧菌,螺旋體和大多數致病性的無(wú)芽胞桿菌都呈現負反應。
在治療上,大多數革蘭氏陽(yáng)性菌都對青霉素敏感(結核桿菌對青霉素不敏感);而革蘭氏陰性菌則對青霉素不敏感(但奈瑟氏菌中的流行性腦膜炎雙球菌和淋病雙球菌對青霉素敏感),而對鏈霉素、氯霉素等敏感。所以首先區分病原菌是革蘭氏陽(yáng)性菌還是陰性菌,在選擇抗生素方面意義重大。
革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌在化學(xué)組成和生理性質(zhì)上有很多差別,染色反應不一樣,F在一般認為革蘭氏陽(yáng)性菌體內含有特殊的核蛋白質(zhì)鎂鹽與多糖的復合物,它與碘和結晶紫的復合物結合很牢,不易脫色,陰性菌復合物結合程度底,吸附染料差,易脫色,這是染色反應的主要依據。另外,陽(yáng)性菌菌體等電點(diǎn)較陰性菌為低,在相同PH條件下進(jìn)行染色,陽(yáng)性菌吸附堿性染料很多,因此不易脫去,陰性菌則相反。所以染色時(shí)的條件要嚴格控制。例如,在強堿的條件下進(jìn)行染色,兩類(lèi)菌吸附堿性染料都多,都可呈正反應;PH很低時(shí),則可都呈負反應。此外,兩類(lèi)菌的細胞壁等對結晶紫—碘復合物的通透性也不一致,陽(yáng)性菌透性小,故不易被脫色,陰性菌透性大,易脫色。所以脫色時(shí)間,脫色方法也應嚴格控制。
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