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醫學(xué)碩士研究生開(kāi)題報告

時(shí)間:2024-09-03 06:55:36 開(kāi)題報告 我要投稿

醫學(xué)碩士研究生開(kāi)題報告(合集)

  隨著(zhù)個(gè)人素質(zhì)的提升,報告有著(zhù)舉足輕重的地位,要注意報告在寫(xiě)作時(shí)具有一定的格式。那么大家知道標準正式的報告格式嗎?下面是小編收集整理的醫學(xué)碩士研究生開(kāi)題報告(合集),僅供參考,歡迎大家閱讀。

醫學(xué)碩士研究生開(kāi)題報告(合集)

  一、立題依據(科學(xué)意義及國內外現狀分析及參考文獻)

  惡性黑色素瘤是一種高度惡性且最具侵襲性的癌之一,多發(fā)生于皮膚,早期發(fā)生血行轉移。對放、化療不敏感,在世界范圍內發(fā)病率增高,人們一直在期待著(zhù)可以征服惡性黑素瘤的新的療法的出現!

  最近大量的數據表明惡性腫瘤的發(fā)展與T-鈣粘蛋白的表達變化相關(guān).T-鈣粘蛋白已在乳腺癌、前列腺癌、肝癌、肺癌[1-3] 、胃癌、胰腺癌、卵巢癌[4-9]等多種惡性腫瘤中被檢測到表達減少.最近的研究表明T/H—鈣粘蛋白在乳腺癌中的重新表達能抑制腫瘤細胞的生長(cháng),降低體外培養的腫瘤細胞的侵襲潛能[1].T/H—鈣粘蛋白這個(gè)新型鈣粘蛋白分子在人類(lèi)許多癌細胞中表達都降低表明它或許在腫瘤細胞的侵襲和轉移[10]及維持正常細胞的表型中起重要作用[11].

  T/H—鈣粘蛋白與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著(zhù)密切的聯(lián)系,也許它會(huì )為腫瘤的診斷和治療帶來(lái)新的契機.

  T-鈣粘蛋白是否對惡性黑色素瘤也有作用,目前還沒(méi)有相關(guān)研究的報道,所以本實(shí)驗將進(jìn)行相關(guān)方面的探討性研究!

  二、研究?jì)热菁邦A期成果(說(shuō)明具體研究?jì)热、?chuàng )新點(diǎn)及擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題、預期成果及提供形式)

  研究?jì)热荩?/p>

  第一部分:正常表皮組織、痣細胞及黑色素瘤細胞中T-cadherin表達情況

  第二部分T-cadherin基因克隆和真核表達載體的構建

  第三部分:T-cadherin基因的真核表達及生物活性分析

  創(chuàng )新點(diǎn):首次將T-cadherin基因轉染黑素瘤細胞

  擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題:通過(guò)RT-PCR反應擴增出T-cadherin的基因全長(cháng)。

  預期成果及提供形式:

  觀(guān)察T-鈣粘蛋白在正常皮膚組織細胞、痣細胞及黑色素瘤細胞中的表達情況!

  進(jìn)一步闡明T-鈣粘蛋白作用機制

  T-鈣粘蛋白基因轉染入黑色素瘤細胞后觀(guān)察對其增殖和轉移活性的抑制情況,探索臨床診斷和治療黑色素瘤及其它腫瘤的方法!

  三、研究方案(包括研究方法、技術(shù)路線(xiàn)、研究進(jìn)度安排)

  研究方法:

  第一部分:正常表皮組織、痣細胞及黑色素瘤細胞中T-cadherin表達情況

  免疫組織化學(xué)和免疫細胞化學(xué)

  1.材料:從正常人皮膚切取的痣組織,人黑色素瘤細胞株

  2.主要試劑和溶液

  (1)第一抗體:兔抗人T-cadherin抗體

  (2)第二抗體:生物素標記羊抗兔IgG

  (3) “三抗”:鏈親和霉素標記HRP

  3.設備

  4.方法

  (1)冷凍切片的免疫染色程序

  (2)活細胞的免疫染色程序

  5.熒光顯微鏡檢

  注意:為保證結果的可靠性應該同時(shí)設有對照

  陽(yáng)性對照(正常組織) ;

  陰性對照(PBS代替一抗)以證明抗體的特異性。

  第二部分T-cadherin基因克隆和真核表達載體的構建

  1.材料:

  (1)組織和細胞

  (2)菌株與質(zhì)粒

  (3)工具酶

  (4)試劑

  (5)儀器

  2.方法

  (1)引物的設計

  (2)總RNA的提。寒惲蚯杷犭-酚-氯仿抽提一步法

  (3)甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳分析其質(zhì)量,觀(guān)察所提RNA有無(wú)明顯降解;

  (4)逆轉錄RT反應:為了證實(shí)RT反應的成功設管家基因GAPDH為內對照

  (5)PCR擴增:利用上下游引物,在DNA聚合酶下對目的片段進(jìn)行擴增,PCR過(guò)程設β-actin為內對照

  (6)PCR產(chǎn)物的回收、純化

  (7)PCR產(chǎn)物的克隆

  (8)DNA序列測定

  (9)真核重組表達質(zhì)粒的構建

  (10)陽(yáng)性重組質(zhì)粒的鑒定和篩選

  (11)質(zhì)粒的大量提取

  (12)轉染黑色素瘤細胞

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