醫學(xué)碩士研究生開(kāi)題報告(合集)
隨著(zhù)個(gè)人素質(zhì)的提升,報告有著(zhù)舉足輕重的地位,要注意報告在寫(xiě)作時(shí)具有一定的格式。那么大家知道標準正式的報告格式嗎?下面是小編收集整理的醫學(xué)碩士研究生開(kāi)題報告(合集),僅供參考,歡迎大家閱讀。
一、立題依據(科學(xué)意義及國內外現狀分析及參考文獻)
惡性黑色素瘤是一種高度惡性且最具侵襲性的癌之一,多發(fā)生于皮膚,早期發(fā)生血行轉移。對放、化療不敏感,在世界范圍內發(fā)病率增高,人們一直在期待著(zhù)可以征服惡性黑素瘤的新的療法的出現!
最近大量的數據表明惡性腫瘤的發(fā)展與T-鈣粘蛋白的表達變化相關(guān).T-鈣粘蛋白已在乳腺癌、前列腺癌、肝癌、肺癌[1-3] 、胃癌、胰腺癌、卵巢癌[4-9]等多種惡性腫瘤中被檢測到表達減少.最近的研究表明T/H—鈣粘蛋白在乳腺癌中的重新表達能抑制腫瘤細胞的生長(cháng),降低體外培養的腫瘤細胞的侵襲潛能[1].T/H—鈣粘蛋白這個(gè)新型鈣粘蛋白分子在人類(lèi)許多癌細胞中表達都降低表明它或許在腫瘤細胞的侵襲和轉移[10]及維持正常細胞的表型中起重要作用[11].
T/H—鈣粘蛋白與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著(zhù)密切的聯(lián)系,也許它會(huì )為腫瘤的診斷和治療帶來(lái)新的契機.
T-鈣粘蛋白是否對惡性黑色素瘤也有作用,目前還沒(méi)有相關(guān)研究的報道,所以本實(shí)驗將進(jìn)行相關(guān)方面的探討性研究!
二、研究?jì)热菁邦A期成果(說(shuō)明具體研究?jì)热、?chuàng )新點(diǎn)及擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題、預期成果及提供形式)
研究?jì)热荩?/p>
第一部分:正常表皮組織、痣細胞及黑色素瘤細胞中T-cadherin表達情況
第二部分T-cadherin基因克隆和真核表達載體的構建
第三部分:T-cadherin基因的真核表達及生物活性分析
創(chuàng )新點(diǎn):首次將T-cadherin基因轉染黑素瘤細胞
擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題:通過(guò)RT-PCR反應擴增出T-cadherin的基因全長(cháng)。
預期成果及提供形式:
觀(guān)察T-鈣粘蛋白在正常皮膚組織細胞、痣細胞及黑色素瘤細胞中的表達情況!
進(jìn)一步闡明T-鈣粘蛋白作用機制
T-鈣粘蛋白基因轉染入黑色素瘤細胞后觀(guān)察對其增殖和轉移活性的抑制情況,探索臨床診斷和治療黑色素瘤及其它腫瘤的方法!
三、研究方案(包括研究方法、技術(shù)路線(xiàn)、研究進(jìn)度安排)
研究方法:
第一部分:正常表皮組織、痣細胞及黑色素瘤細胞中T-cadherin表達情況
免疫組織化學(xué)和免疫細胞化學(xué)
1.材料:從正常人皮膚切取的痣組織,人黑色素瘤細胞株
2.主要試劑和溶液
(1)第一抗體:兔抗人T-cadherin抗體
(2)第二抗體:生物素標記羊抗兔IgG
(3) “三抗”:鏈親和霉素標記HRP
3.設備
4.方法
(1)冷凍切片的免疫染色程序
(2)活細胞的免疫染色程序
5.熒光顯微鏡檢
注意:為保證結果的可靠性應該同時(shí)設有對照
陽(yáng)性對照(正常組織) ;
陰性對照(PBS代替一抗)以證明抗體的特異性。
第二部分T-cadherin基因克隆和真核表達載體的構建
1.材料:
(1)組織和細胞
(2)菌株與質(zhì)粒
(3)工具酶
(4)試劑
(5)儀器
2.方法
(1)引物的設計
(2)總RNA的提。寒惲蚯杷犭-酚-氯仿抽提一步法
(3)甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳分析其質(zhì)量,觀(guān)察所提RNA有無(wú)明顯降解;
(4)逆轉錄RT反應:為了證實(shí)RT反應的成功設管家基因GAPDH為內對照
(5)PCR擴增:利用上下游引物,在DNA聚合酶下對目的片段進(jìn)行擴增,PCR過(guò)程設β-actin為內對照
(6)PCR產(chǎn)物的回收、純化
(7)PCR產(chǎn)物的克隆
(8)DNA序列測定
(9)真核重組表達質(zhì)粒的構建
(10)陽(yáng)性重組質(zhì)粒的鑒定和篩選
(11)質(zhì)粒的大量提取
(12)轉染黑色素瘤細胞
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