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檢驗技師考點(diǎn):熒光色素

時(shí)間:2024-05-30 07:14:08 檢驗技師/士 我要投稿
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檢驗技師考點(diǎn):熒光色素

  許多物質(zhì)都可產(chǎn)生熒光現象,但并非都可用作熒光色素。只有那些能產(chǎn)生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱(chēng)為免疫熒光色素或熒光染料。常用的熒光色素有:

  1.異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)為黃色或橙黃色結晶粉末,易溶于水或酒精等溶劑。分子量為389.4,最大吸收光波長(cháng)為490——495nm,最大發(fā)射光波長(cháng)520——530nm,呈現明亮的黃綠色熒光,結構式如下:有兩種同分異結構,其中異構體Ⅰ型在效率、穩定性、與蛋白質(zhì)結合能力等方面都更好,在冷暗干燥處可保存多年,是應用最廣泛的熒光素。其主要優(yōu)點(diǎn)是:①人眼對黃綠色較為敏感,②通常切片標本中的綠色熒光少于紅色。

  2.四乙基羅丹明(rhodamine,RIB200)為橘紅色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮。性質(zhì)穩定,可長(cháng)期保存。結構式如下:最大吸收光波長(cháng)為570nm,最大發(fā)射光波長(cháng)為595~600nm,呈橘紅色熒光。

  3.四甲基異硫氰酸羅丹明(tetramethylrhodamineisothiocyanate,TRITC)結構式如下:最大吸引光波長(cháng)為550nm,最大發(fā)射光波長(cháng)為620nm,呈橙紅色熒光。與FITC的翠綠色熒光對比鮮明,可配合用于雙重標記或對比染色。其異硫氰基可與蛋白質(zhì)結合,但熒光效率較低。

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