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人UroplakinII與小鼠UroplakinII啟動(dòng)子活性和組織特異性對比
畢業(yè)論文
全部作者: | 朱宏建 曾祥福 魏守順 郭應祿 |
第1作者單位: | 武警總醫院泌尿外科 |
論文摘要: | 膀胱癌是泌尿外科最常見(jiàn)的惡性腫瘤,基因治療已成為治療惡性腫瘤的重要方法之1。本研究旨在探討人UroplakinII (UPII) 啟動(dòng)子與小鼠UPII啟動(dòng)子在人細胞株中的啟動(dòng)活性和組織特異性強弱。方法: 構建以人或小鼠UPII啟動(dòng)子為調控基因,以綠色熒光蛋白(GFP)和熒光素激酶(Luc)為報告基因的重組質(zhì)粒,應用脂質(zhì)體轉染技術(shù),將重組質(zhì)粒轉染入膀胱移行細胞癌細胞(BIU-87)和腎癌細胞(GRC-1)、臍靜脈血管內皮細胞(EC)、肺癌細胞(A549)、皮膚成纖維細胞(Hs27),利用共聚焦顯微鏡、流式細胞儀和微板檢測儀觀(guān)察細胞表達GFP和Luc的情況。結果: 含人UPII啟動(dòng)子重組質(zhì)粒轉染后,BIU-87表達GFP較多,10-15/HP,亮度較強,流式細胞儀測定表達量為10.1%。而GRC-1、EC細胞表達極少,0-5/HP,亮度暗,流式細胞儀測定表達量為0和1.8%。Luc在BIU-87中的表達量是其它組織細胞的2.2倍以上。含小鼠UPII啟動(dòng)子重組質(zhì)粒轉染后,BIU-87表達GFP較多,5~10/HP,亮度較強,流式細胞儀測定表達量為4.34%。而EC細胞表達極少,0~2/HP,亮度暗,流式細胞儀測定表達量分別為0%。Luc在BIU-87中的表達量是其他組織細胞的1.8~8.2倍,人UPII啟動(dòng)子與小鼠UPII啟動(dòng)子相比,無(wú)論是GFP還是Luc差異有顯著(zhù)性(P<0.01)。結論: 人UPII 啟動(dòng)子比小鼠UPII啟動(dòng)子在人細胞株中具有更高的啟動(dòng)活性和更低的組織特異性。為靶向性基因治療膀胱癌提供了實(shí)驗依據。 |
關(guān)鍵詞: | UroplakinII;啟動(dòng)子;膀胱癌 遠程下載 論文(免費PDF論文全文) |
發(fā)表日期: | 2006年11月30日 |
同行評議: | (暫時(shí)沒(méi)有) |
綜合評價(jià): | (暫時(shí)沒(méi)有) |
修改稿: |
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