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小鼠不同部位骨髓組織病理切片分析
骨髓存在于長(cháng)骨的骨髓腔,扁骨和不規則骨的松質(zhì)骨中,以下是小編搜集整理的一篇小鼠不同部位骨髓組織病理切片探究的論文范文,供大家閱讀查看。
小鼠不同部位骨髓組織病理切片分析
骨髓是機體的主要造血器官,由骨髓實(shí)質(zhì)和造血微環(huán)境組成,其造血功能的強弱可通過(guò)骨髓病理切片反應出來(lái)。當骨髓被致病因素抑制時(shí),骨髓實(shí)質(zhì)分化增殖不良,造血微環(huán)境的改變均可導致機體造血功能下降.因此,眾多實(shí)驗研究者通常選擇制作骨髓組織病理切片并觀(guān)察其鏡下特點(diǎn),以此作為檢測造血系統損傷的指標之一。
在大量實(shí)驗研究制作小鼠骨髓病理切片時(shí),實(shí)驗者大多選擇將小鼠處死后取其股骨,作為制作切片的主要取材部位,也有研究報道采用取小鼠腰椎骨髓或胸骨骨髓的方法制作骨髓病理切片。對于選取何處病理組織制作切片最能反映機體的造血功能,尚鮮有報道。本實(shí)驗通過(guò)選取小鼠不同部位骨髓組織制作病理切片,鏡下觀(guān)察其骨髓實(shí)質(zhì)及造血微環(huán)境,探尋能夠更好反映小鼠骨髓病理變化的部位,為今后動(dòng)物實(shí)驗制作骨髓病理切片的取材部位選擇提供理論依據。
1材料和方法
1.1實(shí)驗動(dòng)物
健康SPF級昆明種小鼠10只,雄性,6~8周齡,體重18~22g,由西安交通大學(xué)醫學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗中心提供【SCXK(陜)2013-001】,在陜西中醫藥大學(xué)中藥藥理實(shí)驗室【SYXK(陜)2007-006】中取材。
1.2儀器與材料
E220光學(xué)生物顯微鏡(0lympus公司)、病理圖文系統分析工作站、輪轉式切片機、推片與烤片兩用器、蘇木精-伊紅(HE)染液等。
1.3方法
健康SPF級昆明種小鼠10只,適應性飼養7d后,頸椎脫臼處死并解剖,分別取小鼠脛骨、股骨、顱骨、胸骨、髂骨等5個(gè)不同部位制做骨髓病理切片,常規HE染色,40倍光鏡下觀(guān)察并拍照。
2結果
光鏡下各部位骨髓切片均可見(jiàn)不同分化階段粒、紅、巨核細胞,但脛骨、股骨骨髓切片鏡下脂肪細胞較多,支架結構較疏松;顱骨、胸骨骨髓切片鏡下造血紅系、粒系細胞數量較少,微環(huán)境排列較松散;唯有髂骨骨髓切片鏡下紅系、粒系細胞大量存在,分布均勻且排列緊密,血竇和巨核細胞清晰,粒細胞胞漿嗜堿性,增生活躍,并可見(jiàn)核分裂像,骨髓造血組織支架結構緊密且脂肪細胞數量較少,可較好的反映骨髓的造血功能。因此,可將髂骨作為制作骨髓病理切片的首選取材部位(彩插5圖1).
3討論
骨髓存在于長(cháng)骨(如脛骨、股骨)的骨髓腔,扁骨(如髂骨、肋骨)和不規則骨(胸骨、脊椎骨等)的松質(zhì)骨中,觀(guān)察骨髓切片可以全面了解骨髓造血細胞的增生程度、分布及細胞密度,還可以反應骨髓細胞原先的面貌[10].小鼠出生時(shí),全身骨髓腔內充滿(mǎn)具有造血功能的紅骨髓,隨著(zhù)年齡增長(cháng),骨髓中脂肪細胞逐漸增多,相當一部分紅骨髓被沒(méi)有造血功能的黃骨髓取代,僅在椎管、胸骨、肋骨、髂骨、顱骨及股骨和肱骨上端的松質(zhì)內保留有紅骨髓?紤]到在制作骨髓病理切片時(shí),椎管、顱骨等部位取材較困難,目前實(shí)驗研究多選取小鼠股骨作為制作骨髓病理切片的主要部位。但因具有造血功能的紅骨髓多存在于股骨上端的骨松質(zhì)內,在制作骨髓切片時(shí)不易將其與位于股骨干內的黃骨髓分離,因此鏡下觀(guān)察股骨骨髓病理切片脂肪細胞較多,造血細胞比例明顯下降,不利于反映骨髓的造血功能。
本實(shí)驗通過(guò)對比小鼠不同部位的骨髓病理切片,鏡下觀(guān)察骨髓實(shí)質(zhì)和造血微環(huán)境,發(fā)現小鼠髂骨較顱骨、胸骨、股骨、脛骨等其他部位骨髓切片顯示造血細胞更清晰、分布更均勻,其支架結構更緊密,脂肪細胞含量較少,且實(shí)驗的可行性和操作性較強,可作為制作骨髓病理切片的一個(gè)最佳取材部位。
小鼠不同部位骨髓組織病理切片分析
對小鼠不同部位骨髓組織進(jìn)行病理切片分析時(shí),實(shí)驗者通常選取股骨作為主要取材部位。但是,股骨中具有造血功能的紅骨髓主要存在于股骨上端的骨松質(zhì)內,制作切片時(shí)不易將其與位于股骨干內的黃骨髓分離。因此,鏡下觀(guān)察股骨骨髓病理切片時(shí),脂肪細胞較多而造血細胞比例明顯下降,不利于反映骨髓的造血功能。
本實(shí)驗通過(guò)對比小鼠不同部位的骨髓病理切片,發(fā)現小鼠髂骨的骨髓切片顯示造血細胞更清晰、分布更均勻、支架結構更緊密且脂肪細胞含量較少。此外,選取髂骨作為取材部位的可操作性和可行性也較強。
值得注意的是,骨髓存在于長(cháng)骨如脛骨、股骨的骨髓腔和扁骨如髂骨、肋骨以及不規則骨如胸骨、脊椎骨等,對于選取何處病理組織制作切片最能反映機體的造血功能,尚鮮有報道。本實(shí)驗僅為拋磚引玉,今后的研究可對不同部位骨髓組織切片進(jìn)行更全面的觀(guān)察和分析,綜合評判其對反映造血功能的代表性。
總結來(lái)說(shuō),小鼠不同部位骨髓組織病理切片具有差異性。髂骨在小鼠骨髓切片分析中顯示出較好的實(shí)驗效果,可以作為制作骨髓病理切片的一個(gè)潛在最佳取材部位。
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