檢驗技師考點(diǎn)：酶活性測定

　　20世紀50年代以前大都使用固定時(shí)間法。這種方法是以酶催化反應的平均速度來(lái)計算酶的活性，現多已不用。50年代中期開(kāi)始采用連續監測法。這種方法用自動(dòng)生化分析儀上完成，可以測酶反應的初速度，其結果遠比固定時(shí)間法準確，在高濃度標本尤為明顯，但本法也受到反應時(shí)間，反應溫度，試劑等的影響，應加以注意。

　　1)定時(shí)法：

　　通過(guò)測定酶反應開(kāi)始后某一時(shí)間段內(t1到t2)產(chǎn)物或底物濃度的總變化量來(lái)求取酶反應初速度的方法，稱(chēng)為兩點(diǎn)法，其中t1往往取反應開(kāi)始的時(shí)間。在酶反應一定時(shí)間后，往往通過(guò)加入強酸、強堿、蛋白沉淀劑等，使反應完全停止，所以也叫中止反應法。

　　2)連續監測法：

　　又稱(chēng)為動(dòng)力學(xué)法或速率法、連續反應法。在酶反應過(guò)程中，用儀器監測某一反應產(chǎn)物或底物濃度隨時(shí)間的變化所發(fā)生的改變，通過(guò)計算求出酶反應初速度。

　　3)平衡法：

　　通過(guò)測定酶反應開(kāi)始至反應達到平衡時(shí)產(chǎn)物或底物濃度總變化量來(lái)求出酶活力的方法，又叫終點(diǎn)法。

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