不合格標本對檢驗結果的影響

　　臨床檢驗工作中遇到的不合格標本主要表現在溶血、凝血、污染、采集量不足或過(guò)多、標識錯誤等。不合格標本產(chǎn)生的原因主要包括：(1)使用了錯誤的容器或添加劑;(2)使用了不恰當的采血器具，如使用規格過(guò)小或過(guò)大的針頭容器，使用過(guò)大的負壓真空管等;(3)樣本標識錯誤;(4)標本采集過(guò)程中的操作不規范使標本發(fā)生溶血;(5)采血量過(guò)少或過(guò)多;(6)標本污染。不合格標本肯定會(huì )影響檢驗結果。下面是yjbys小編為大家帶來(lái)的關(guān)于不合格標本對檢驗結果的影響的知識，歡迎閱讀。

　　一、血細胞計數和分類(lèi)計數

　　采血不順暢、抗凝劑比例不當或混勻不徹底使得抗凝不充分導致的血液凝固或血細胞聚集，導致相應細胞計數結果的偏低;聚集的細胞還可能被儀器誤判為其他細胞數量的不準確。

　　末梢血采集過(guò)程中過(guò)分擠壓造成組織液混入，導致血小板的聚集，導致血小板計數值偏低，同時(shí)組織液的混入還可引起血液的稀釋。

　　抽血、混勻手法過(guò)于劇烈或添加物不當造成的溶血，可導致細胞計數結果偏低。在末梢血采集時(shí)，消毒劑未完全干燥之前進(jìn)行穿刺可能導致血細胞的破壞，引起計數結果偏低。

　　炎癥浸潤部位采血導致局部炎癥細胞的混入，導致細胞形態(tài)的不正常，血細胞的黏附、聚集合并導致細胞分類(lèi)計數結果受影響。

　　血液細胞學(xué)檢查應使用EDTA抗凝，錯誤的抗凝劑可能引起血細胞形態(tài)的變化，造成血細胞計數和分類(lèi)的不準確，如草酸鹽和肝素抗凝可引起血小板數、白細胞數和淋巴細胞計數結果的偏低。

　　二、出凝血項目

　　采血不順暢、血量過(guò)少引起抗凝劑比例不當或混勻不徹底使得抗凝劑不充分，導致凝血過(guò)程激活和凝血因子的消耗。這種情況可能引起內源性、外源性凝血時(shí)間的延長(cháng)以及部分凝血因子測定結果的偏低。錯誤的抗凝劑如EDTA、肝素，尤其是肝素會(huì )造成PT、APTT時(shí)間的延長(cháng);抽血不順暢，壓脈帶綁扎時(shí)間過(guò)長(cháng)(不宜超過(guò)30s)引起血流淤帶或血管受損可能引起組織因子進(jìn)入血液，造成部分凝血因子測定結果降低。

　　三、紅細胞沉降率

　　標本溶血、采血不順暢、抗凝劑比例不當或混勻不徹底等使得凝血激活，血漿成分改變，紅細胞形態(tài)變化等標本采集缺陷均可能引起不同程度的紅細胞聚集，從而引起血細胞沉降率的加快。此時(shí)可能引起組織因子進(jìn)入血液，造成部分凝血因子測定結果降低。

　　四、生物化學(xué)項目

　　生物化學(xué)主要測定人體內的離子、酶類(lèi)和代謝物質(zhì)。這些物質(zhì)在人體不同組織、細胞內濃度差異比較大，受溶血影響大;部分物質(zhì)如酶類(lèi)和代謝產(chǎn)物穩定性差，易降解，還有化學(xué)方法本身特異性較差，易受標本中異常物質(zhì)的干擾，因此生物化學(xué)項目的檢測對標本要求較高。

　　1.溶血：當溶血發(fā)生時(shí)，紅細胞內容物進(jìn)入血漿，引起血漿成分的改變，對一些細胞內外濃度差較大的檢測項目(如谷草轉氨酶、乳酸脫氫酶、鉀)的測定結果造成較大的影響。

　　2.脂血：脂血主要是由于血清中的乳糜微粒增多引起的，因后者具有散射光的特性，對比色法和比濁法均可產(chǎn)生嚴重的干擾，而且這種干擾不能通過(guò)雙波長(cháng)進(jìn)行消除。

　　3.黃疸：膽紅素在400～540nm波長(cháng)處有光吸收，標本放置時(shí)間過(guò)長(cháng)或通過(guò)氧化劑后膽紅素還可被氧化為膽綠素、膽褐素，這些物質(zhì)同樣可以引起光吸收的改變，從而影響檢驗結果，對于單波長(cháng)的儀器這種影響更為顯著(zhù)。

　　4.抽血不順暢、壓脈帶使用可導致靜脈血血流的瘀滯，造成血乳酸濃度的升高。

　　5.血氣分析樣品在樣本采集過(guò)程中若未排空氣或未與空氣完全隔離，則可能引起氧分壓測定結果升高，二氧化碳分壓測定結果降低。

　　五、免疫學(xué)檢測項目

　　免疫學(xué)項目是通過(guò)標記或不標記的抗原抗體反應對被測物(抗原或抗體)進(jìn)行測定，由于抗原抗體反應具有很好的特異性，因此測定結果受影響相對較少。然而由于免疫學(xué)檢查項目被測物含量一般較低，若樣本存在缺陷，尤其是交叉污染，一旦發(fā)生，對結果產(chǎn)生的影響可能較大。免疫學(xué)測定常用的方法包括免疫濁度法、酶標記顯色的方法，如ELISA和免疫印跡、熒光標記的方法、膠體金標記的斑點(diǎn)滲濾或層析方法，不同的檢測方法對標本缺陷的敏感性不同。

　　1.免疫濁度法。使用光學(xué)方法直接對抗原抗體反應產(chǎn)生的沉淀進(jìn)行檢測，因此對標本的顏色、透明度比較敏感，嚴重的溶血、脂血和黃疸可能對此類(lèi)實(shí)驗產(chǎn)生干擾，造成結果偏高。

　　2.酶標記顯色技術(shù)。通常使用辣根過(guò)氧化物酶等進(jìn)行標記并催化底物顯色，標本中如有強還原劑污染(如維生素C輸注同側肢體采血)時(shí)，會(huì )對結果產(chǎn)生影響，產(chǎn)生假陰性。另外由于血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶活性，嚴重的溶血標本也可能催化底物顯色，提高本底或產(chǎn)生假陽(yáng)性。

　　六、血培養

　　不合格血培養標本主要為污染、血液和培養液比例不當、不恰當的血培養瓶。

　　1.污染 采集不規范可以造成污染可能發(fā)生于血培養操作的任何階段，大量研究表明，皮膚定植菌群是血培養污染的常見(jiàn)細菌，說(shuō)明皮膚消毒的不徹底和采血操作不當是污染的主要原因。采血過(guò)程中血液易受到皮膚表面菌群的污染，主要在外周靜脈穿刺時(shí)，局部皮膚消毒不徹底，細菌隨針刺帶入被檢血液而被培養出來(lái)。其次，長(cháng)期留置血管導管的患者，其導管長(cháng)期暴露于皮膚外界，造成這些菌群的移生。血液培養也常從這些導管處采血，因此經(jīng)常會(huì )在采血過(guò)程中將導管內移生的細菌帶走而培養出來(lái)。即使嚴格的無(wú)菌操作采集血標本也很難將污染率控制在2%以下。血培養污染將導致不必要的抗生素治療，延長(cháng)住院時(shí)間，增加患者醫療費用和細菌耐藥性的產(chǎn)生。

　　2.血液和培養瓶比例不當 成人和兒童血培養血量的采集標準不同，應嚴格按照廠(chǎng)家推薦的標準進(jìn)行采集，采血量過(guò)多或少均會(huì )降低血培養的陽(yáng)性率。

　　3.選擇不恰當的血培養瓶 全自動(dòng)血培養瓶的種類(lèi)有普通瓶、中和抗生素瓶、厭氧瓶、兒童瓶等，每一種培養瓶滿(mǎn)足不同的臨床需求，選擇不恰當的血培養瓶將降低陽(yáng)性率。

　　七、分子生物學(xué)檢測項目

　　分子生物學(xué)標本的不合格常見(jiàn)于抽血操作不規范引起的外源核酸污染。模板RNA降解以及PCR抑制物的存在。

　　1.外源核酸污染 由于PCR的靈敏度非常高，理論上一個(gè)核酸分子的污染都有可能引起結果的假陽(yáng)性，因此PCR標本采集最好使用無(wú)菌、無(wú)核酶的一次性器材，取材必須嚴格執行無(wú)菌操作，并小心防止混入操作者或受檢者的毛發(fā)、皮屑等。密封運輸和保存，不能在擴增區域進(jìn)行標本的采集和處理，防止PCR產(chǎn)物的污染。

　　2.靶基因的降解 一般情況下，無(wú)菌采集的DNA樣本穩定性較好，在室溫下放置8h仍不影響檢驗，但如果操作不當、抽血容器不清潔、放置時(shí)間過(guò)長(cháng)或有污染，DNA鏈有可能發(fā)生斷裂，使長(cháng)片段的擴增變得困難。靶基因降解對于RNA樣品影響更為嚴重，由于環(huán)境中大量RNA酶的存在，若樣品保存、運輸條件不佳或存放時(shí)間過(guò)長(cháng)，模板RNA非常容易降解，造成假陰性。

　　3.PCR抑制物 反轉錄反應和PCR反應均為酶促反應，任何可能抑制這些反應的物質(zhì)都會(huì )影響檢驗的結果。樣本采集缺陷導致的常見(jiàn)的抑制物包括肝素、血紅蛋白、乳鐵蛋白、IgG、蛋白酶、纖維素等。

　　八、末梢血和靜脈穿刺樣本分析物的差異

　　盡管末梢血和靜脈血分析物差異很小，但葡萄糖、鉀、總蛋白和鈣等項目的統計學(xué)和(或)臨床存在顯著(zhù)性差異。末梢血的血紅蛋白、葡萄糖、鉀檢測的結果高于靜脈血，而鈉、氯、鈣、膽紅素和總蛋白的檢測結果低于靜脈血。末梢血氧分壓和氧飽和度低于動(dòng)脈血。運用末梢血檢測這些項目時(shí)應建立參考范圍，同時(shí)在檢驗報告上注明標本類(lèi)型。

　　對于不合格的標本，即使實(shí)驗室采用最好的方法和技術(shù)，檢測工作都是無(wú)效的勞動(dòng)，檢測結果會(huì )貽誤患者的及時(shí)診斷和正確治療。因此，正確采集標本是臨床檢驗分析前階段質(zhì)量保證不可或缺的重要環(huán)節，也是保證臨床檢驗結果準確、可靠、有效的基礎。

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