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中藥材半顯微性狀鑒定法
【摘 要】：目的：尋找出一種適合基層使用的簡(jiǎn)單方便的鑒別材的方法。方法：通過(guò)不同儀器下觀(guān)察藥物的實(shí)驗，以對藥材的分辨率，觀(guān)察的清晰度為指標，以不同的儀器底色的不同光線(xiàn)的強度差別為主要考察因素，探索半顯微性狀鑒別最佳方法及條件。結果：體視顯微鏡觀(guān)察最清楚，掃描儀也能比較清楚地觀(guān)察，放大鏡觀(guān)察的結果就不太理想，且底色與藥材的對比度不同對實(shí)驗結果也有影響。結論：此種方法簡(jiǎn)便易行，對操作人員的專(zhuān)業(yè)知識要求不高，是一種很好的適用于基層的藥材鑒別方法。
【關(guān)鍵詞】：半顯微性狀鑒定 放大鏡 掃描儀 體視顯微鏡
傳統作為中國寶貴資源，在治病及養生方面有著(zhù)極其重要的作用，由于藥物療效與藥材的質(zhì)量關(guān)系密切，因此對藥材進(jìn)行鑒別而保證藥物療效就非常重要�，F已被廣泛應用的藥材鑒定方法有顯微鑒定，性狀鑒定等。顯微鑒定是利用顯微技術(shù)對中藥的細胞組織構造特征進(jìn)行顯微觀(guān)察與分析，以確定其品種和質(zhì)量的一種鑒定方法;性狀鑒定是一種傳統的鑒別方法，是通過(guò)眼觀(guān)手摸鼻聞口嘗水試火試等十分簡(jiǎn)便的鑒定方法，來(lái)鑒別藥材的外觀(guān)性狀。本文則建立了一種介于性狀和顯微鑒別方法之間的另一類(lèi)鑒別方法，它是借助放大鏡掃描儀體式顯微鏡等儀器觀(guān)察中藥材細微的外觀(guān)性狀，可稱(chēng)它為半顯微性狀鑒定�！鞍腼@微“是指它對中藥表面特征的放大是界于肉眼和生物顯微鏡之間，例如它可以把一個(gè)蘇子放大到一個(gè)乒乓球大小，非常清楚地顯示其表面的紋理，但它還不能看清楚植物細胞的形態(tài)，所以它還是屬于“性狀鑒別”范疇。但由于它是借助儀器對藥材表面的肉眼看不清的特征進(jìn)行觀(guān)察，這也與傳統的性狀鑒定有較大的區別。半顯微性狀鑒別法主要用于細小的果實(shí)種子類(lèi)扁平的中藥飲片葉類(lèi)及花類(lèi)藥材的觀(guān)察。對于形體大而厚的藥材的整體觀(guān)察則不適用，但亦可用于觀(guān)察其表面細微處的特征。按照這種方法所用到的儀器不同，可分為放大鏡半顯微形狀鑒定，掃描儀半顯微形狀鑒定，體視顯微鏡半顯微性狀鑒定。
1 放大鏡半顯微性狀鑒定
放大鏡法就是利用一般的放大鏡來(lái)觀(guān)察藥材，此種方法簡(jiǎn)便易行，放大鏡又方便攜帶，所以是鑒別藥材形狀的一種經(jīng)常使用的基本方法。但缺點(diǎn)是放大鏡的分辨率不是很高，對于一些藥材的更為細微的特征，放大鏡的效果就不是很理想。而且利用放大鏡所得的觀(guān)察結果很難記錄下來(lái)，除非親自觀(guān)察，否則很難從觀(guān)察者的描述中得到很深的印象。
2 掃描儀半顯微性狀鑒定
掃描儀法是利用電腦掃描儀來(lái)鑒別藥材的方法，掃描儀已是常用的辦公用具。它除了有文件掃描功能，還有兩個(gè)強大的功能——實(shí)物掃描功能和圖像放大功能，后兩個(gè)功能可被利用對中藥材進(jìn)行半顯微性狀鑒別。具體方法如下：
2。鑒別用儀器 一臺中等以上配置的電腦，像素為1200～2400的掃描儀。
2。軟件 在電腦中加裝Photoshop6。0以上的圖像處理軟件。
2。2。軟件介紹 Photoshop是一種現被廣泛使用的圖形處理和瀏覽軟件，其功能之齊全是一般的其它圖形處理軟件所不能比的。包括了所有圖形的基本處理，對圖形進(jìn)行加工。能支持數碼相機掃描儀體視顯微鏡直接捕獲圖象。我們就是利用它的這種功能將它應用于掃描儀半顯微性狀。具體功能使用方法將在下面進(jìn)行詳細介紹。
2。3 掃描過(guò)程
2。3。打開(kāi)軟件 打開(kāi)Photoshop，點(diǎn)左上角的[文件]下拉出菜單，指向[導入]，就可以看到你的掃描儀的型號了，雙擊掃描儀的型號，即可在Photoshop的背景下進(jìn)行掃描。
2。3。普通掃描 選擇好藥材樣品，將需要放大的部分朝下放，上面蓋上合適顏色的背板（通常情況下，用白紙即可），在掃描儀上進(jìn)行預掃;再用取景框框住要掃描的藥材，在24bit色彩，像素300～600間（根據景框的大小選擇）對藥材進(jìn)行普通掃描，可見(jiàn)藥材的圖像被直接展示在Photoshop中。
2。3。3 高精掃描 為了得到更加清晰的掃描結果，能更好地選擇掃描指數來(lái)觀(guān)察藥材，選擇要放大的區域（區域選擇不能太大，否則會(huì )占用很大的電腦空間），把像素調至2400，進(jìn)行掃描，可見(jiàn)藥材被放大的圖像也被直接展示在Photoshop中。觀(guān)察這一圖像，看看你對光線(xiàn)的強弱，對比度的大小等，滿(mǎn)意不滿(mǎn)意，如果你感覺(jué)不行，可以調整后重新掃描。
2。3。4 圖像的進(jìn)一步放大 關(guān)掉掃描儀，這時(shí)的Photoshop調整亮度和對比度，一般都可以得到較好的圖像，可以清楚地看見(jiàn)藥材的細微特征。就可以看到放得很大的藥材圖像。如果對圖像不夠滿(mǎn)意，還可以點(diǎn)Photoshop 就可以起用了，用工具欄中的放大鏡對圖像進(jìn)行放大，你上的[圖像] 下拉出菜單，指向[調整]，在下拉菜單中點(diǎn)[亮度/對比度]，分別調整亮度和對比度，一般都可以得到較好的圖象，可以清晰地看見(jiàn)藥材的細微特征。
3 體視顯微鏡半顯微性狀鑒定
體視顯微鏡法與掃描儀法很相似，就是利用體視顯微鏡對材的表面特征進(jìn)行觀(guān)察鑒定。它可以直接觀(guān)察，也可以用一臺體視顯微鏡和電腦相連，通過(guò)電腦中的軟件觀(guān)察顯微鏡材的表面特征，并可以拍攝下來(lái)的一種藥材鑒別方法。這種體視顯微鏡與普通生物顯微鏡不同，它的放大倍數一般在10—40之間，生物顯微鏡的放大倍數則多在40倍以上。由于兩者光的來(lái)源不同，因而觀(guān)察樣品的圖象部位也有所區別，體視顯微鏡的光源為反射光，適合于觀(guān)察物體的表面，可以清楚地看到其表面特征，與物體的厚度無(wú)關(guān);普通生物顯微鏡的光源為透射光，適合于觀(guān)察薄片樣品內部的組織構造等，當薄片的厚度超過(guò)一定范圍之后就不容易看清楚了。體視顯微鏡法與放大鏡相比的優(yōu)點(diǎn)就是比普通放大鏡的分辨率高，能將肉眼無(wú)法看到的細微特征分辨得很清楚。下面將仔細介紹這種方法的使用儀器和具體操作步驟：
3。鑒別用儀器 一臺中等以上配置的電腦，體視顯微鏡一臺，目鏡一個(gè)，連接電腦的數據線(xiàn)。
3。軟件 電腦中加裝Ulead photo explorer軟件。
3。2。軟件介紹 這也是一個(gè)圖形處理和瀏覽軟件，包括了所有圖形的基本處理，對圖形進(jìn)行加工。也是一個(gè)圖片瀏覽器。支持多達幾十種圖片格式，可以把同類(lèi)圖片合并成一個(gè)圖片集，加上背景作成屏幕保護或壁紙等等，還支持圖形旋轉轉換基本圖形處理功能（具有photoshop的一些插件功能），也支持數碼相機掃描儀體視顯微鏡直接捕獲圖象。這里利用的就是他能支持體視顯微鏡直接捕獲圖象的功能
3。3 操作步驟
3。3。打開(kāi)軟件 將體視顯微鏡通過(guò)電子目鏡和數據線(xiàn)接到電腦上。再打開(kāi)Ulead photo explorer軟件，點(diǎn)左上角的[文件]菜單，選擇其子菜單[TWAIN獲取]，會(huì )彈出下級子菜單，選擇[選取來(lái)源]項，會(huì )出現一個(gè)窗口列舉了可供選擇的來(lái)源，點(diǎn)擊USB PC Camera選項，就把該軟件調到了合適的狀態(tài)。再點(diǎn)擊工具欄中的[TWAIN獲取]項，視頻窗口就可出現。該窗口有五個(gè)單選按扭，分別為Device Format Preference SnapshotExit。 選擇Device按扭，單擊USB PC Camera項，即可進(jìn)入可以拍照狀態(tài)。
3。3。實(shí)物拍照 將需鑒別藥材放入體視顯微鏡物鏡下進(jìn)行觀(guān)察，調整顯微鏡使得藥材的表面特征能被最清楚地顯示出來(lái)。這時(shí)電腦視頻窗口也會(huì )顯示顯微鏡下可觀(guān)察的圖象。如覺(jué)得圖象還不夠理想，可選擇Preference項進(jìn)行調整。雙擊Preference按扭會(huì )出現圖象調整對話(huà)框。該對話(huà)框可分為Image control In/Outdoor Display等若干區域。Image control區域較常用，可通過(guò)調節Brightness（亮度）Contrast（對比度）hue（色度）等來(lái)使得圖象最清楚。In/Outdoor區僅有Indoor（門(mén)內）和Outdoor（門(mén)外）兩個(gè)單選按扭，經(jīng)我們初步實(shí)驗摸索可知這兩個(gè)按扭是用于調節光線(xiàn)強弱的。Display區有LCD和 CRT兩個(gè)單選按扭，LCD是Liquid Crystal Display（液晶顯示）的縮寫(xiě)，CRT是Cathode Ray Tube（使用陰極射線(xiàn)管）的縮寫(xiě)。一般情況只需調節這幾項，其它選項隨系統自己而定即可。當圖象效果很好時(shí)點(diǎn)擊確定按扭即完成對圖象的調整。這時(shí)單擊Snapshot即可以拍攝圖象。
3。3。3 保存文件 拍攝圖象的同時(shí)軟件本身已將其保存在地址欄顯示的文件夾內。，單擊工具欄中[打開(kāi)查看器]工具就可以查看圖象文件，這時(shí)圖象會(huì )出現在一個(gè)只保存有圖象的查看器窗口里面，通過(guò)這個(gè)窗口可再次對照片進(jìn)行調整和保存等處理。調整操作和前面相同，對圖象另保存的操作如下：?jiǎn)螕舨榭雌鞔翱诠ぞ邫谥械腫另存為]工具，就會(huì )彈出一個(gè)文件另存為對話(huà)框，在這個(gè)對話(huà)框內的地址欄鍵入你希望文件保存地址，然后點(diǎn)擊保存，圖象文件就會(huì )復制一份保存入你選擇的地址。在這個(gè)查看器窗口內你還可以對圖象進(jìn)行剪切懸轉放大縮小等一系列的操作。
3。3。4 再次拍照 當你想從查看器窗口返回到視頻窗口時(shí)，使用窗口工具欄最左端的返回工具就可以完成。然后在視頻窗口又可以像第一次拍照一樣對同一藥材進(jìn)行再次拍照或對其他的藥材進(jìn)行拍照。后面的調整保存等操作也相同。
現已被廣泛應用的鑒定方法可用于絕大多數藥材的鑒定，且能從不同角度鑒別同一藥材，但這些鑒別方法也有其難以克服的不足。例如性狀鑒別對包括形狀大小顏色表面特征質(zhì)地折斷面氣味水試火試等方面的鑒別。藥材的大小是指長(cháng)短粗細厚薄。而對于藥材上的一些細微特征的觀(guān)察，特別是有些很小的種子類(lèi)藥材，如葶藶子芥子車(chē)前子菟絲子等時(shí)，肉眼不好區分其形狀如何，藥材表面是光滑還是粗糙，有無(wú)皺紋皮孔或毛茸等。又如雙子葉植物的根類(lèi)藥材頂部有的帶有根莖;單子葉植物根莖有的具膜質(zhì)鱗葉;蕨類(lèi)植物的根莖常帶有葉柄殘基和鱗片。但很多藥材的表面特征通過(guò)肉眼也是觀(guān)察不到的，必須借助于一定的儀器來(lái)觀(guān)察。顯微鑒定是利用顯微技術(shù)對中藥進(jìn)行顯微分析，以確定其品種和質(zhì)量的一種鑒定方法。顯微鑒定主要包括組織鑒定和粉末鑒定。組織鑒定是通過(guò)觀(guān)察藥材的切片鑒別其組織構造特征，適合于完整的藥材或粉末特征相似的同屬藥材的鑒別;粉末鑒定是通過(guò)觀(guān)察藥材的粉末制片鑒別其細胞分子及內含物的特征，適合于破碎粉末狀藥材或中成藥的鑒別。進(jìn)行顯微鑒定，鑒定者必須具有植（動(dòng)）物解剖的基本知識，掌握制片的基本技術(shù)。由于鑒定的不同（完整破碎粉末）和藥用種類(lèi)及藥用部位的不同，選擇顯微鑒定的方法也不同。鑒定時(shí)，首先要根據觀(guān)察的對象和目的，選擇具有代表性的藥材，制備不同的顯微制片，然后依法進(jìn)行鑒別[1]。這些都局限了顯微鑒定這種方法的廣泛性普遍性。
基于上面兩種方法的優(yōu)點(diǎn)和不足，我們就半顯微性狀鑒別方法進(jìn)行了研究探索。從以上的實(shí)驗結果看來(lái)，這種方法利用了低倍的顯微儀器來(lái)觀(guān)察藥材以求結果的準確性及區分藥物的廣泛性，而不用像一般顯微鑒定那樣對藥材進(jìn)行復雜的解剖，并根據鑒定材料的不同和藥用種類(lèi)及藥用部位的不同而使用不同的制片方法，選擇不同的顯微鑒定方法，這就使得這種方法保留了一般顯微鑒定的準確的特點(diǎn)而不用操作那么復雜。另外它仍是對鑒別材料的表面特征進(jìn)行鑒別而無(wú)法觀(guān)察到藥材組織構造特征細胞分子及內含物的特征，因此我們仍將這種方法歸為性狀鑒定的范圍內，但這是種特殊的性狀鑒定方法，既具有一般性狀鑒定的簡(jiǎn)單易行迅速的特點(diǎn)，又比其觀(guān)察的更為細致：而且可以避免一般顯微鑒定操作復雜的弊端。綜合這種半顯微性狀鑒定法的各方面特征，可知它是種介于性狀鑒定和顯微鑒定中間的方法，有其獨特的優(yōu)點(diǎn)，是對現有的四大鑒別方法的重要補充。
參考文獻
[1]康廷國主編。中藥鑒定學(xué)[M]。北京：中國藥出版社，2003：34—39
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