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龍膽藥材與常見(jiàn)偽品的數碼顯微鑒別
【摘要】 目的建立快速檢驗龍膽藥材質(zhì)量的方法。方法在性狀鑒別的基礎上,采用顯微數碼成像技術(shù),對龍膽類(lèi)商品藥材進(jìn)行了顯微鑒別。結果龍膽藥材與其偽品通過(guò)不同的顯微特征，可以一一區分。結論建立的方法簡(jiǎn)單、快捷、有效，可以控制龍膽藥材的質(zhì)量。
【關(guān)鍵詞】 龍膽； 數碼顯微鑒定； 偽品
Microscopic Identification of Radix Gentianae by Digital Imaging Technique
CAO Yue， ZUO Dai?ying， SUN Qi?shi, ZHA Mei?na, ZHAO Jing?yuan
1.Liaoning Provincial Institute of Food and Drug Control, Shenyang 110023,China；2. Shenyang Pharmacological University, Shenyang 110016,China; 3. Liaoning Provincial Hospital in Qinyuan, Qingyuan 113300, China
Abstract：ObjectiveTo establish a rapid method for Radix Gentiana scabra Bge. by digital imaging technique.MethodsBased on the morphological identifiion, we further studied the microscopic structures of the collected samples by digital imaging technique.ResultsRadix Gentiana scabra Bge. and its counterfeit goods were identificated respectively.ConclusionThe method is simple, fast, effective and can control the quality of medicines Gentiana.
Key words： Radix Gentiane scabre； Digital microscopic identification； Counterfeit goods
龍膽為龍膽科植物條葉龍膽Gentiana manshurica Kitag．，龍膽Gentiana scabra Bge．，三花龍膽Gentiana triflora Pall．或堅龍膽Gentiana rigescens Franch．的干燥根及根莖［1］。前三者習稱(chēng)“龍膽”，后一種習稱(chēng)“堅龍膽”，具有清熱燥濕、瀉肝膽實(shí)火的作用。近年來(lái)龍膽的商品藥材中時(shí)常摻偽，為了控制龍膽及其制劑的質(zhì)量，本文收集了龍膽及常見(jiàn)的偽品，在性狀鑒別的基礎上，采用數碼成像技術(shù)進(jìn)行了顯微鑒定。
1 器材與方法
CAMAG RepROSTAR3數碼成像系統，OLYMPUS CX41-32C02顯微鏡，OLYMPUS BX51顯微鏡。
龍膽藥材，為遼寧天瑞綠色產(chǎn)業(yè)科技開(kāi)發(fā)有限公司GAP生產(chǎn)基地的栽培品種；三花龍膽采自吉林長(cháng)白山；堅龍膽、小秦艽Gentiana dahurica Fisch.購買(mǎi)于安國市場(chǎng)；草本威靈仙Veronicastrum sibirecum (L.)Pennell.采自遼寧省桓仁縣和本溪市；桃兒七Podophyllum emodi Wall.樣品由沈陽(yáng)藥科大學(xué)中藥學(xué)院孫啟時(shí)教授提供，以上品種均由其鑒定。見(jiàn)表1。
取藥材樣品，粉碎，置于載玻片上，分別加水或水合氯醛透化后制成表面片。結合性狀，將制備好的切片置顯微鏡下觀(guān)察,根據《中國藥典》和相關(guān)研究專(zhuān)論［2］進(jìn)行鑒定,數碼相機拍攝,用成像工作站結合其它的圖像軟件對圖像進(jìn)行裁剪、拼接等處理。
2 結果
2.1 顯微鑒別
2.1.1 龍膽Gentiana scabra Bge．外皮層碎片細胞長(cháng)大，完整者表面觀(guān)呈類(lèi)紡錘形，長(cháng)100～457 μm,直徑35～103 μm；內皮層碎片細胞巨大，完整者表面觀(guān)呈類(lèi)方形、長(cháng)方形或扁方形，長(cháng)（縱向）68～498 μm導管主為梯紋及網(wǎng)紋導管，直徑15～51 μm，另有少數螺紋導管（根莖），直徑約12 μm；草酸鈣針晶較多，不規則散在于薄壁細胞中或充塞于細胞一角。極纖細，有的呈細棱狀、棒狀或小顆粒狀，長(cháng)約至10 μm，根莖薄壁細胞中的針晶常密集成堆或條狀。見(jiàn)圖1。職稱(chēng)論文
2.1.2 三花龍膽Gentiana triflora Pall．草酸鈣針晶較多，不規則充塞于薄壁細胞中。大多極纖細，有的呈細棱形或短小似細顆粒，長(cháng)1～9 μm；根莖薄壁細胞中的針晶常密集成堆或條狀，有的便于細胞一端；石細胞較多。呈類(lèi)圓形、類(lèi)多角形，有的一邊尖突，長(cháng)42～99 μm，直徑29～45 μm，壁厚薄不勻，7～16 μm紋孔類(lèi)圓形或裂縫狀，孔溝較粗或先端擴大，有的胞腔內含細小針晶；內皮層碎片細胞巨大，完整者表面觀(guān)呈扁方形、類(lèi)長(cháng)方形或類(lèi)方形，長(cháng)141～457 μm，直徑49～556 μm，端壁平直，側壁細波狀彎曲，平周壁現纖細的橫向線(xiàn)狀紋理；外皮層碎片細胞長(cháng)大，完整者表面觀(guān)呈長(cháng)紡錘形、類(lèi)橢圓形、類(lèi)長(cháng)方形，長(cháng)85～360（～498） μm，直徑34～94 μm，壁稍彎曲或細波狀，每個(gè)細胞有1～13（～16）橫隔壁，將細胞分隔成2～14（～17）個(gè)小細胞，橫隔壁常連珠狀增厚。見(jiàn)圖2。表1 樣品來(lái)源（略）
2.1.3 堅龍膽Gentiana rigescens Franch．草酸鈣方晶較多，散在于薄壁細胞中。呈類(lèi)方形或片狀，細小，直徑4～11 μm；內皮碎片細胞巨大，完整者表面觀(guān)呈類(lèi)方形或類(lèi)長(cháng)方形，長(cháng)124～320 μm，直徑81～200 μm，端壁稍彎曲，側壁較平直或稍彎曲，平周壁現較粗而密的橫向線(xiàn)狀紋理，粗至3 μm，每個(gè)大細胞有4～14縱隔壁，將細胞分隔成5～15個(gè)柵狀小細胞，縱隔壁稍增厚，或呈連珠狀；草酸鈣針晶眾多，不規則充塞于薄壁細胞中。纖細，有的呈棱狀或細桿狀，長(cháng)4～9（～18） μm，粗3 μm，也有針晶密集成堆；導管主為具緣紋孔導管，直徑8～30 μm；纖維主為纖維管胞，呈長(cháng)棱形，直徑11～33 μm，壁厚3～6 μm，具緣紋孔明顯，紋孔口短縫狀或十字狀，稍超出紋孔緣。見(jiàn)圖3。
2.1.4 小秦艽Gentiana dahurica Fisch.草酸鈣針晶較少，散在或存在于薄壁細胞中。微小，針狀或桿狀，長(cháng)約至10 μm。也有結晶呈微細粒狀；內皮層細胞（根須）偶見(jiàn)，多單個(gè)散在，淡黃綠色或幾個(gè)無(wú)色。呈長(cháng)條形，兩端平截或稍?xún)A斜，直徑11～25 μm，長(cháng)約至315 μm，壁邊增厚一邊薄，厚約至11 μm，孔溝外口呈龐狀突起，表面觀(guān)呈細小雙圈狀；栓化細胞成片，常與厚壁網(wǎng)紋細胞上下連接淡黃色或近無(wú)色。表面觀(guān)呈類(lèi)棱形或長(cháng)方形，直徑20～63 μm，長(cháng)至180 μm；厚壁網(wǎng)紋細胞較多，數個(gè)毗連或單個(gè)散在，常與栓化細胞上下連接，淡黃色、淡綠色或淡棕色。呈類(lèi)棱形、類(lèi)紡錘形、類(lèi)三角形、類(lèi)長(cháng)方形或類(lèi)圓形，有的一端斜尖，直徑20～66 μm，長(cháng)64～216 μm，壁螺狀或網(wǎng)狀增厚，木化，有的螺狀增厚壁斜向交錯扭結，網(wǎng)孔形狀、大小不一，有的呈縱或斜裂縫狀、不規則類(lèi)長(cháng)圓形、細小橢圓形，或紋孔偶見(jiàn)；導管主為網(wǎng)紋、螺紋導管，偶有網(wǎng)狀具緣紋孔導管，直徑9～55 μm，有的導管分子較短，長(cháng)約104 μm。見(jiàn)圖4。
2.1.5 草本威靈仙Veronicastrum sibirecum (L.)Pennell.淀粉粒較多；中柱鞘纖維多成束,有時(shí)伴有石細胞； 石細胞散在或成群,類(lèi)方形、短紡錘形或不規則形,壁孔明顯。見(jiàn)圖5。
2.1.6 桃兒七Podophyllum emodi Wall.根橫切面：表皮細胞1列，外側壁具馬蹄形增厚的角質(zhì)層。下皮細胞1列；皮層寬，約占橫切面的3/4；內皮層凱氏點(diǎn)可見(jiàn)；初生木質(zhì)部4～5原型，無(wú)髓。見(jiàn)圖6。
2.2 性狀鑒別及顯微鑒別檢索見(jiàn)表2～3。表2 性狀鑒別檢索表
1.根表面具有橫皺紋（略）表3 顯微鑒別檢索表（略）
3 討論
本文收集了藥用龍膽及其偽品，并從性狀、顯微等常規經(jīng)驗鑒別手段入手，解決了龍膽與常見(jiàn)偽品的鑒別方法，通過(guò)表2、表3，可以將龍膽與偽品一一加以區分。建立的方法簡(jiǎn)單、快捷、有效，可以控制藥材的質(zhì)量。顯微鑒別中使用偏光顯微鏡，可以使草酸鈣晶體、淀粉粒等清晰可見(jiàn)，有效縮短檢驗時(shí)間，提高效率。
【參考文獻】
［1］國家藥典委員會(huì ).中國藥典，Ⅰ部［S］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：64.
［2］徐國鈞.中藥材粉末顯微鑒定［M］.北京：人民衛生出版社，2009：58.
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