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化學(xué)合成siRNA阻斷小鼠骨髓源性不成熟樹(shù)突狀細胞GAPDH的表達
畢業(yè)論文
| 全部作者： | 蔡端 顧曉冬 項建斌 陳宗佑 |
| 第1作者單位： | 復旦大學(xué)附屬華山醫院 |
| 論文摘要： | 目的 觀(guān)察化學(xué)合成siRNA在轉錄后水平即mRNA水平降低小鼠不成熟樹(shù)突狀細胞基因表達的效率，并對其影響因素進(jìn)行初步探討。方法 體外取小鼠脛骨和股骨的骨髓，分離、培養不成熟樹(shù)突狀細胞，應用化學(xué)合成的不同濃度siRNA在LipofectAMINE 2000轉染試劑介導下轉染樹(shù)突狀細胞，流式細胞儀檢測siRNA的轉染效率，RT-PCR檢測小鼠不成熟樹(shù)突狀細胞中GAPDH mRNA水平的變化，臺盼藍染色測定各組中培養細胞的存活率。結果 脂質(zhì)體能夠將化學(xué)合成siRNA轉入樹(shù)突狀細胞中，轉染終濃度為100～600nmol/L的siRNA能特異有效地阻斷GAPDH的表達，而轉染終濃度為50～400nmol/L的siRNA有利于細胞存活。結論 siRNA能在不成熟樹(shù)突狀細胞內啟動(dòng)RNA干擾作用，適宜濃度的siRNA能在特異有效地阻斷內源性基因表達的同時(shí)，最大限度地保持細胞活力。 |
| 關(guān)鍵詞： | siRNA；樹(shù)突狀細胞；GAPDH；RNA干擾 遠程下載 論文(免費PDF論文全文) |
| 發(fā)表日期： | 2006年10月17日 |
| 同行評議： | （暫時(shí)沒(méi)有）
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| 綜合評價(jià)： | （暫時(shí)沒(méi)有） |
| 修改稿： |
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