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寄生蟲(chóng)實(shí)驗動(dòng)物保種
人類(lèi)應用殺蟲(chóng)劑防制蚊蟲(chóng)已有70年歷史。40年代初二二三問(wèn)世后,在全球范圍內均作為滅蚊的主要殺蟲(chóng)劑,但不到10年就發(fā)現蚊媒對二二三的抗藥性成為滅蚊的主要障礙。我國在50年代中后期開(kāi)始大規模使用有機氯等合成殺蟲(chóng)劑防制蚊蟲(chóng),抗藥性亦隨著(zhù)殺蟲(chóng)劑用量的增長(cháng)和品種的發(fā)展而演變。
目前,庫蚊抗藥性的監測和研究報道較多,但有關(guān)嗜人按蚊抗藥性的監測和研究較少[1~6]。媒介按蚊對殺蟲(chóng)劑敏感性監測是目前滅蚊防瘧工作的重要內容之一。在嗜人按蚊區,進(jìn)行殺蟲(chóng)劑敏感性測試,包括WHO推薦的區分劑量和LT50或LC50測試,是很有必要的。通過(guò)定期監測,了解蚊群對當時(shí)使用的殺蟲(chóng)劑的敏感程度,抗性的分布和程度,對可能替代的殺蟲(chóng)劑敏感性以及對已產(chǎn)生抗性的殺蟲(chóng)劑停止使用后蚊群敏感性恢復程度,為瘧疾防治合理使用殺蟲(chóng)劑提供科學(xué)依據,F將國內各地有關(guān)嗜人按蚊對常用殺蟲(chóng)劑的敏感性監測概況介紹如下。
1 試驗材料
1.1 成蟲(chóng)來(lái)源
采集從現場(chǎng)(監測點(diǎn))捕獲嗜人按蚊吸血的成蚊,帶回實(shí)驗室產(chǎn)卵孵化幼蟲(chóng)飼養,蛹羽化后24h內測定;驕y試前夜捕捉剛吸血之蚊蟲(chóng),帶回實(shí)驗室飼養至次日上午供測試用,此時(shí)胃血消化約在謝拉氏Ⅲ~Ⅳ期。
1.2 試驗藥物
二二三、馬拉硫磷、溴氰菊酯和氯菊酯,含量在95%以上。
1.3 制備藥膜濾紙
98%溴氰菊酯(法國產(chǎn)),按WHO要求制作藥膜濾紙,含溴氰菊酯3.57mg/m2(濃度0.01%),8.93mg/m2(濃度0.025%),或其它濃度。
2 測試方法
參照WHO 585號(1976)、655號(1980)、818號(1992)等技術(shù)報告;劉維德等:“七種病媒蚊類(lèi)對擬除蟲(chóng)菊酯抗性分布及防治對策研究”;“我國尖音庫蚊種團抗藥性現狀—兼論半數致死劑量與區分劑量的關(guān)系”。論述用蚊蟲(chóng)敏感品系LT99.9乘2或用死亡率99.9%~100.0%之間的劑量作為檢測蚊類(lèi)抗藥性的區分劑量。
2.1 我國區分劑量法(我國推薦:溴氰菊酯3.57mg/m2,濃度0.01%)
蚊蟲(chóng)接觸藥膜濾紙30min,恢復飼養24h,記錄死亡率。死亡率>99%為敏感群體(S),死亡率80%~98%為初步抗性群體(M),死亡率<80%為抗性群體(R),并設空白對照。
2.2 WHO區分劑量法(WHO推薦:溴氰菊酯8.93mg/m2,濃度0.025%)
蚊蟲(chóng)接觸藥膜濾紙60min,恢復飼養24h,記錄死亡率。設立對照和評判標準同上。
2.3 半數致死時(shí)間(LT50)測定
即以一種濃度測試不同接觸時(shí)間(如15min、25min、35min、45min、55min)。接觸后,將蚊蟲(chóng)置蚊籠內飼養24h,計算死亡率。至少重復實(shí)驗1次,另設對照。死亡率按Abott公式校正,用回歸分析方法計算LT50及LT95。
3 結果
3.1 區分劑量測定結果
3.1.1 四川的嗜人按蚊對四種殺蟲(chóng)劑在實(shí)驗室和現場(chǎng)測定的結果 PP′-二二三接觸1h,濃度在10.0g/L以上時(shí),死亡率多數接近100.0%;在10.0g/L以下,死亡率只有67.78%。溴氰菊酯對實(shí)驗室品系,濃度在0.6g/L~2.0g/L之間,接觸30~60min,死亡率最高僅90.48%;現場(chǎng)測試濃度在0.01g/L以上,接觸30~64min,死亡率在90.83%~100.0%。氯菊酯用1.0g/L濃度,接觸60~64min,死亡率為93.33%~100.0%。馬拉硫磷用1.0g/L濃度,接觸16~32min,死亡率為96.30%~100.0%(表1)。
根據以上結果,初步建議嗜人按蚊對四種殺蟲(chóng)劑的區分劑量如下:PP′-二二三:濃度10g/L,1h;溴氰菊酯,濃度1.0g/L,接觸30min;氯菊酯:濃度1.0g/L,接觸1h;馬拉硫磷:濃度1.0g/L,接觸20min。
3.1.2 湖北省溴氰菊酯3.57mg/m2(濃度0.01%)區分劑量法測定的結果 湖北省從1990年開(kāi)始以15mg/m2溴氰菊酯浸泡蚊帳滅蚊防瘧。1995年調查結果表明,中華按蚊、嗜人按蚊成蚊對溴氰菊酯并未出現抗性。以WHO制訂的區分劑量測試,浸帳4年組和浸帳1年組死亡率無(wú)區別,均為100%。但以我國推薦的區分劑量測試,雖無(wú)抗性群體,敏感群體亦只有2個(gè),初抗群體占調查點(diǎn)的83%(表1)。這種差異似與兩者的區分劑量不同有關(guān),我國推薦的溴氰菊酯劑量為3.57mg/m2,WHO推薦的為8.93mg/m2。
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