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呼吸道常見(jiàn)病毒的臨床表現及實(shí)驗室診斷
呼吸道病毒是指以呼吸道為主要傳播途徑，能引起兒童呼吸系統及全身感染的一些病毒。目前已證實(shí)，95%的兒童急性上呼吸道疾病和大部分下呼吸道疾病是由細菌以外的病原引起，其中以呼吸道病毒最常見(jiàn)，主要包括流感病毒、副流感病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、呼吸道合胞病毒、鼻病毒、冠狀病毒、風(fēng)疹病毒、腺病毒和皰疹病毒等。據統計，兒童每年平均患急性呼吸道病毒感染2～7次。下面是yjbys小編為大家帶來(lái)的關(guān)于呼吸道常見(jiàn)病毒的臨床表現及實(shí)驗室診斷的知識，歡迎閱讀。
【病毒特征及臨床表現】
流感病毒(Flu)屬單鏈RNA病毒，可分為甲型(A)、乙型(B)和丙型(C)。流行高峰在冬春季，潛伏期1～3天，患兒發(fā)病突然，年幼兒常見(jiàn)高熱驚厥，多出現咳嗽、嘔吐等癥狀，常并發(fā)肺炎及支氣管炎。
人類(lèi)副流感病毒(PIV)是單鏈RNA病毒.共分4型，1型是與哮喘相關(guān)的病原，6個(gè)月至3歲為多發(fā)年齡;2型PIV感染較少見(jiàn)且很少發(fā)生嚴重疾病.3型PIV傳染性較大，4型PIV感染僅有輕度呼吸道癥狀。
呼吸道合胞病毒(RSV)基因是一個(gè)負鏈RNA，是世界范圍內嬰幼兒病毒性下呼吸道感染最重要的病毒病原。毛細支氣管炎發(fā)病率在2月齡的嬰兒中最高，6個(gè)月～12個(gè)月的要兒RSV肺炎的發(fā)生率最高，3歲以后小兒RSV感染時(shí)，毛細支氣管炎已較少見(jiàn)。每年45%～50%住院嬰幼兒毛細支氣管炎是由RSV直接感染所致。
腺病毒(ADV)屬于DNA病毒，有100多個(gè)型別。腺病毒肺炎是嬰幼兒期危害較大的疾病，潛伏期平均4～6天，其臨床特點(diǎn)是高熱且持續時(shí)間長(cháng)，有明顯的神經(jīng)系統癥狀，呼吸困難，但肺部體征出現較晚，全身各系統均可受累。約80%的腺病毒肺炎發(fā)生在6個(gè)月至2歲的小兒，年長(cháng)兒病情較輕，或僅表現為上呼吸道感染的癥狀。
麻疹是由麻疹病毒(MV)引起的以發(fā)熱、呼吸道卡他癥狀和出疹為主的急性傳染病，廣泛流行于全世界。肺炎是麻疹最常見(jiàn)的并發(fā)癥，約占10%或稍多，大多見(jiàn)于出疹期。麻疹病毒只有一個(gè)血清型，6個(gè)月至5歲兒童發(fā)病率最高，病后免疫力持久。
流行性腮腺炎是由腮腺炎病毒(MUMPS)所致的急性呼吸道傳染病，以腮腺的非化膿性腫脹和疼痛為特征，傳播途徑主要為通過(guò)唾液飛沫吸人。腮腺炎病毒的基因組為單股負鏈RNA，只有一個(gè)血清型。1～2歲兒童腮腺炎病毒感染主要表現為呼吸道和肺部癥狀，冬春兩季的發(fā)病人數要多于夏季。
【實(shí)驗室診斷】
1.病毒分離及鑒定(以RSV為例)
(1)操作程序：用負壓吸取患兒鼻咽深部分泌物1～2ml，加入PBS2～3ml，用吸管反復吹打至分泌物完全混勻，2000rpm離心10分鐘，棄去上清、沉淀物再次做上述處理，用上清液接種于Hep-2或MDCK細胞，在含有2%牛血清的MEM培養基中生長(cháng)，33℃旋轉培養，連續觀(guān)察細胞變化，出現特征性融合病變者為陽(yáng)性;若盲傳3代仍無(wú)病變出現，則確定為陰性。
(2)方法學(xué)評價(jià)：該法雖然特異性較強，但試驗周期時(shí)間長(cháng)，一般1～2周才能有結果，且成本較高,如果傳代細胞不敏感，或存在細菌、支原體混合感染等情況，會(huì )導致病毒分離的陽(yáng)性率低，標本內病毒含量少時(shí)亦會(huì )出現假陰性結果，因此臨床不作為常規檢測使用。
2.間接法ELISA(以麻疹病毒IgM為倒)
(1)實(shí)驗原理：間接法HLISA主要用于檢測抗體，它是將已知抗原包被在固相載體，加上待測抗體的標本，最后用酶標抗抗體間接的將其檢出。
(2)操作程序：①稀釋標本將血清標本用稀釋液1：100倍稀釋?zhuān)胖?5分鐘后加入酶標板中，每次實(shí)驗加入陰、陽(yáng)性對照及空白對照各一孔，每孔100μl，室溫30分鐘;②洗板4次，在吸水紙上拍干;③加入酶標記物，每孔100μl，室溫30分鐘;④重復步驟②;⑤人底物液，每孔l00μl，室溫避光15分鐘顯色;⑥加入終止液，每孔100μl，以450nm波長(cháng)測量其OD值;⑦結果判斷：臨界值=陽(yáng)性對照值×0.2+陰性對照值
標本OD值<臨界值×0.85，判為陰性結果，標本OD值>臨界值×1.15，判為陽(yáng)性結果，介于二者之間為可疑值，應于7～14日后重新采集新鮮樣品檢測。
3.注意事項
(1)檢測IgM抗體時(shí)，因試荊盒提供的稀釋液中已經(jīng)含有類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)吸附劑，可去除RF的干擾，但稀釋后必須放置15分鐘以上或4℃過(guò)夜，加樣時(shí)應吸取上清層，不要吸到沉淀物。
(2)間接法ELISA可用于檢測麻疹病毒IgM/IgG，腮腺炎病毒IgM/IgG，及腺病毒IgM等。此方法適合于回顧性診斷或做流行病學(xué)調查，對早期診斷意義有限。
(3)小嬰兒免疫反應較差，RSV抗體升高較慢，恢復期也見(jiàn)不到4倍以上升高，因此ELISA法檢測RSV抗體不用于臨床診斷。
4.臨床意義患兒感染麻疹病毒后，出疹3天內75%可檢測出IgM抗體，7～14天IgM達到高峰，一般一個(gè)月后IgM明顯下降，2～3個(gè)月內完全消失。IgG抗體常與IgM抗體同時(shí)或稍晚出現，25～30天達更高，6個(gè)月內下降2～4倍.以后下降緩慢，維持在一定水平。所以在出疹后3天至一個(gè)月內檢測患兒血清IgM抗體，可為臨床醫生確定其病原提供依據，發(fā)病后7～14天內用ELISA法檢測MV-IgM抗體陽(yáng)性率最高。
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