- 相關(guān)推薦
標本溶血對檢測乙肝表面抗原的影響
在臨床檢測中，常常遇到溶血的標本。溶血對ELISA檢測乙肝表面抗原(HBsAg)究竟是否有影響?下面是yjbys小編為大家帶來(lái)的標本溶血對檢測乙肝表面抗原的影響，歡迎閱讀。
一、標本溶血的原因
溶血是臨床檢驗中最常見(jiàn)的一種干擾和影響因素。溶血可分為體內溶血和體外溶血[1]。體內溶血可由物理因素(如人工心臟瓣膜或大血管手術(shù)后)、化學(xué)因素(如惡性瘧)和藥物毒性反應等因素引起。體外溶血可由物理因素(抽血時(shí)負壓過(guò)大、水浴溫度過(guò)高、冰凍、振蕩等機械性破壞)、化學(xué)因素(血樣接觸表面活性劑)和代謝因素(如遺傳病引起紅細胞脆性增加)引起。
在臨床上常見(jiàn)的引起標本溶血的原因包括[2]:由于病人嚴重脫水、低血容量休克等原因導致穿刺困難造成的溶血;由于抽血器具質(zhì)量不合格如真空管負壓不夠或塑料試管質(zhì)量較差導致的溶血;用干燥管采血為了盡快分離血清用竹簽攪拌不當引起的溶血等。
二、標本溶血對乙肝表面抗原檢測的影響
一些研究沒(méi)有發(fā)現標本溶血對HBsAg檢測的影響。李穗芬[3]對20例HBsAg陰性和10例HBsAg陽(yáng)性病人的溶血和非溶血標本包括10例OD值在臨界值附近的標本進(jìn)行了對照，結果非溶血和溶血標本的陰、陽(yáng)性結果完全一致。20例HBsAg陰性和10例OD值在臨界值附近的樣本，溶血與對應非溶血標本OD值間差異沒(méi)有顯著(zhù)性;10例HBsAg陽(yáng)性樣品，溶血標本OD值明顯大于對應非溶血標本OD值。因此得出結論，標本溶血不影響HBsAg結果的判定，只是使HBsAg陽(yáng)性標本的OD值提高。
許斌等[4]對HBsAg強陽(yáng)性樣品的非溶血與溶血(Hb濃度為241g/L)標本的A值作了對照后未發(fā)現兩者有統計學(xué)差異，得出結論:溶血對HBsAg的檢測沒(méi)有影響(嚴格意義上應表述為:溶血對HBsAg強陽(yáng)性標本的檢測沒(méi)有影響)。單桂秋等[5]的研究也顯示，HBsAg陽(yáng)性樣品的非溶血與溶血標本的A值間經(jīng)t檢驗差異無(wú)顯著(zhù)性。
其他的一些研究則發(fā)現，溶血對HBsAg的檢測有影響。錢(qián)厚明等 [6]發(fā)現，在17例溶血標本中，初檢的5例HBsAg陽(yáng)性標本，經(jīng)重新抽血復檢后有2例仍為陽(yáng)性，另3例轉陰。認為是溶血導致了假陽(yáng)性的出現。劉玉振等[7]研究發(fā)現，溶血對HBsAg的檢測有影響，當紅細胞濃度>25%造成的溶血可導致假陽(yáng)性。龍憲和等[8]研究發(fā)現，無(wú)論在健康人還是乙肝病毒感染者中，溶血均導致了ELISA一步法檢測HBsAg假陽(yáng)性結果的出現，而采用二步法則可以保證結果判讀無(wú)誤。
三、標本溶血對乙肝表面抗原檢測影響的可能機制
溶血是由于各種原因造成紅細胞破壞，胞內血紅蛋白(Hb)等物質(zhì)和細胞內液進(jìn)入血清。溶血對ELISA的影響主要是反應孔對溶血血清中Hb的非特異性吸附和溶血時(shí)細胞內液對血清的稀釋作用。單桂秋等[5]的實(shí)驗也證明了溶血對血清具有稀釋作用。
在ELISA試驗中，酶標反應板孔包被物的濃度是一個(gè)相對定值，抗原抗體反應存在最適比例和后帶現象，因此，HBsAg濃度與A值只是在一定的范圍內呈一定的線(xiàn)性關(guān)系;當HBsAg達到一定濃度時(shí)A值的變化進(jìn)入平臺期;當HBsAg濃度太高時(shí)，A值反而會(huì )降低。因此，溶血可以使HBsAg濃度很高的樣品的A值升高(在一定程度上解決了后帶現象);當HBsAg濃度與A值呈線(xiàn)性關(guān)系時(shí)才會(huì )因溶血的稀釋作用使A值下降;當HBsAg濃度近臨界值時(shí)，可能造成假陰性。
Hb具有類(lèi)過(guò)氧化物酶活性，其作用與辣根過(guò)氧化物酶類(lèi)似，如果反應孔非特異吸附Hb而殘留，則可催化底物顯色，使本底A值升高甚至造成假陽(yáng)性。如果洗滌質(zhì)量好，則可能大大減少或排除非特異性吸附的干擾。單桂秋等[5]的實(shí)驗未體現血中Hb非特異性吸附的影響。龍憲和等[8]采用二步法操作可以排除溶血釋出的Hb對HBsAg檢測的影響也說(shuō)明洗板質(zhì)量在ELISA檢測中的重要性。
總之，溶血對ELISA檢測HBsAg有一定的影響，影響的性質(zhì)及其大小因所使用的試劑、測定方法、標本HBsAg的有無(wú)及濃度高低、洗板的質(zhì)量好壞而異。
【標本溶血對檢測乙肝表面抗原的影響】相關(guān)文章：
標本溶血的原因、影響及對策07-31
標本溶血的控制及對檢驗結果的影響07-24
標本溶血對檢驗結果的影響及其處理方法09-18
標本溶血原因及對生化檢驗項目結果的影響09-02
溶血及脂血標本對生化檢驗項目的影響07-11
標本因素對生化項目檢測的影響201708-10
血液標本采集影響因素09-15
溶血會(huì )影響哪些檢驗結果08-23
標本對生化檢驗結果的影響08-11