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形態(tài)檢查在臨床標本細菌學(xué)檢驗中的作用論文
【摘要】 自動(dòng)化和基因的檢測是臨床細菌學(xué)檢驗的發(fā)展趨勢，但形態(tài)學(xué)觀(guān)察在常規性工作仍是十分重要的。它可對自動(dòng)化儀器檢測的結果進(jìn)行復核和修正。把傳統形態(tài)學(xué)方法與先進(jìn)儀器檢測結合，將能為臨床提供更有效的信息。因此研究和發(fā)展病原生物學(xué)形態(tài)診斷技術(shù)對列舉醫學(xué)證據、完善醫學(xué)診斷具有重要意義。
【關(guān)鍵詞】 臨床標本,細菌學(xué)檢驗
自荷蘭人列文虎克（anton van leeuwenhoek 1632-1725）創(chuàng )制了第一臺可放大250倍的簡(jiǎn)陋顯微鏡，發(fā)現許多肉眼不能發(fā)現的“活的小動(dòng)物”以來(lái)，人類(lèi)對微生物有了初步認識，特別近幾十年來(lái)，微生物學(xué)的研究迅速發(fā)展。涂片直接觀(guān)察是指將臨床送來(lái)作細菌學(xué)檢驗的各類(lèi)標本, 在進(jìn)行革蘭染色之前, 將標本涂成薄片在生物顯微鏡的高倍鏡下直接觀(guān)察, 評價(jià)涂片出現的各種病理情況及各種形態(tài)學(xué)特征, 可判斷病原微生物的感染情況,進(jìn)而結合化學(xué)染色技術(shù)對感染的性質(zhì)作出快速的初步判斷。本文就各種臨床標本的細菌學(xué)檢驗中涂片鏡檢的作用展開(kāi)討論。
1 尿液標本檢驗
尿液標本的濕片直接鏡檢結果往往可以作為進(jìn)一步檢驗的依據,根據涂片鏡檢結果進(jìn)一步安排培養計數和細菌鑒定和藥敏試驗。Www.133229.cOm一般可將未離心的新鮮中段尿搖勻后滴片,用位相顯微鏡油鏡檢查。每份標本檢查10個(gè)視野，每視野中有一個(gè)細菌,相當于每毫升尿液中104～105個(gè)細菌［1］。每油鏡視野中發(fā)現10～1000個(gè)細菌,�？赡苡心蚵犯腥�,這時(shí)即可與臨床聯(lián)系進(jìn)行初報［2］。衛生部2001年新頒發(fā)《醫院感染診斷標準》中也提到“新鮮尿液經(jīng)離心,用相差顯微鏡檢查(400×),在30個(gè)視野中有半數視野見(jiàn)到細菌者可協(xié)助診斷尿路感染” 。如若每個(gè)油鏡視野均未見(jiàn)細菌,取10μl尿液接種在血平板上以防漏檢。若每油鏡視野中含菌0～9個(gè),取10μl 尿液分別接種血液瓊脂平板和中國藍平板上培養后計數。若每油鏡視野含菌10個(gè)或以上,取尿液1μl涂平板計數，如尿液每油鏡視野中細菌達10個(gè)或以上,就可做直接藥敏試驗［3］。
2 痰液標本檢驗
痰標本中存在有大量固有菌群,檢驗中若不能將真正的致病菌檢出,必將對診斷和治療產(chǎn)生誤導。涂片鏡檢可先進(jìn)行標本合格性判定，一般每低倍視野扁平上皮細胞小于10個(gè),白細胞大于25個(gè),細菌較純,種數為1～2種即為合格標本。若每視野中鱗狀上皮細胞≥10個(gè),且發(fā)現種類(lèi)繁多的各種細菌則為口腔唾液，可判斷為標本不合格,若觀(guān)察到一些或很多不含鱗狀上皮細胞的視野,尤其是白細胞大量聚集的地方,換用油鏡檢查,注意細菌形態(tài)及染色性,為1～2種或優(yōu)勢菌很可能為病原菌。認請其細菌形態(tài)特點(diǎn)和染色性,在以后的培養物中要注意這類(lèi)細菌菌落的出現,這時(shí)就可做出初報(向臨床報告標本的情況,有無(wú)炎癥,主要的細菌,革蘭染色性等),必要時(shí)與臨床醫師聯(lián)系了解病人情況。然后選用相應培養基如血液瓊脂平板,巧克力色血平板,中國藍平板等,以四區劃線(xiàn)作半定量分析。另外痰培養的結果一定要和直接鏡檢的結果核對，培養出的優(yōu)勢菌和鏡檢優(yōu)勢菌應相符，若二者不符,要首先考慮直接鏡檢所見(jiàn)［4］。
3 血培養標本檢驗
臨床對血液標本一般不做直接涂片，但對血培養瓶中可疑有菌生長(cháng)者或自動(dòng)分析儀血培養管中生長(cháng)指數超標者, 發(fā)現細菌生長(cháng)信號,應無(wú)菌抽取培養物涂片進(jìn)行革蘭染色,查找細菌, 觀(guān)察細菌形態(tài)及染色性初報細菌的大致類(lèi)別,同時(shí)用位相顯微鏡觀(guān)察有無(wú)細菌形態(tài) 、動(dòng)力等特點(diǎn)，根據顯微鏡檢查的特征, 選擇合適的培養基轉種增菌。對革蘭染色未找到細菌的血培養瓶, 應補充吖啶橙染色檢查,發(fā)現陽(yáng)性者進(jìn)行分離鑒定,未發(fā)現陽(yáng)性則應轉種厭氧和需氧血平板,然后繼續培養監測至最終報告的時(shí)間。顯微鏡檢查如果發(fā)現形態(tài)很均一的細菌,可根據革蘭染色結果選擇抗菌藥物進(jìn)行直接藥敏試驗,同時(shí)轉種培養,發(fā)現菌落,立即做細菌鑒定和標準藥敏試驗。一般在早晨發(fā)現培養陽(yáng)性以后,馬上做藥敏試驗,到下午4～5點(diǎn)時(shí)一般可出初步結果,向臨床初報,為臨床提供快速的信息，以后按常規的檢驗程序進(jìn)行。
4 膿汁標本檢驗
膿汁標本的顯微鏡檢查必檢項目，每份膿汁標本需進(jìn)行革蘭染色和美蘭染色,以顯微鏡油鏡觀(guān)察細菌的種類(lèi)、染色性和膿細胞形態(tài)。如果多形核白細胞占80～90%以上者可判定為急性炎癥,淋巴細胞較多者(>30%)為慢性炎癥。細菌的形態(tài)在原始標本的涂片中常比在培養物中的更典型。在觀(guān)察細菌時(shí)要注意單一或混雜細菌,有無(wú)可疑厭氧菌等。如見(jiàn)著(zhù)色淺而不均的革蘭陰性桿菌常為厭氧菌，提示需作厭氧菌培養。
5 腦脊液標本檢驗
腦脊液涂片顯微鏡鏡檢是腦脊液檢驗的重要項目，對疾病臨床診斷及起始治療起重要作用。臨床微生物實(shí)驗室接到腦脊液標本以后，應該立即進(jìn)行顯微鏡鏡檢,所見(jiàn)結果必須立即向醫師報告。假如腦脊液呈膿性混濁的,可以不經(jīng)過(guò)離心，如為漿液性，需要離心沉淀以后取沉渣作涂片顯微鏡鏡檢，樣材作三張涂片顯微鏡鏡檢。一作革蘭染色,觀(guān)察細菌形態(tài)和染色性,一作美蘭染色,觀(guān)察膿細胞種類(lèi)也觀(guān)察細菌,一張備用作抗酸性染色檢查結核桿菌［5］。初步報告結果以后按常規的檢驗程序進(jìn)行操作。
6 糞便涂片檢驗
糞便標本一般不做直接涂片顯微鏡鏡檢, 但對懷疑有霍亂弧菌、葡萄球菌、彎曲菌、難辨芽胞梭菌和真菌感染者, 需進(jìn)行直接涂片［1］。另外糞便推片革蘭染色檢查觀(guān)察正常菌群的種類(lèi)、數量和比例等可輔助診斷腸道菌群失調癥。若涂片顯微鏡鏡檢觀(guān)察到大片葡萄球菌聚集,說(shuō)明有葡萄球菌結腸炎,培養時(shí)應增用血液瓊脂平板,看到大量產(chǎn)芽胞革蘭陽(yáng)性大桿菌可能為難辨梭菌，結合臨床表現可以診斷抗生素相關(guān)性腹瀉和假膜性腸炎,分離時(shí)可增用ccfa選擇性培基作厭氧培養。腹瀉糞便中常見(jiàn)膿細胞，用位相顯微鏡直接檢查有時(shí)可見(jiàn)動(dòng)力很強的彎曲菌［1］。
總之，現代臨床細菌學(xué)檢驗一方面要依靠高科技逐步建立檢驗自動(dòng)化,另一方面要改進(jìn)工作模式進(jìn)行快速診斷,標本直接涂片檢驗在細菌學(xué)鑒定中非常重要,其結果結合革蘭染色檢查, 可對標本的性質(zhì)可以作出快速的初步判斷。如涂片直接觀(guān)察還可快速檢出真菌(包括念珠菌、隱球菌及其他酵母樣真菌),并增加真菌的培養檢查, 有意識將培養時(shí)間延長(cháng), 以避免漏檢。涂片鏡檢可明確革蘭染色性，是細菌鑒定的前提,若革蘭染色有誤，細菌的其他鑒定肯定也有誤,即使自動(dòng)化儀器也是如此。同時(shí)涂片鏡檢的結果可修正儀器報告出現的錯誤,避免誤報。涂片鏡檢能將標本中達到一定數量的死活菌均可檢出,對培養有重要的補充作用。另外涂片鏡檢有時(shí)還會(huì )獲得意外信息。如發(fā)現非白細胞有核細胞提示存在癌細胞的可能,可提示臨床做腫瘤細胞的檢查。直接涂片觀(guān)察還有利于發(fā)現活動(dòng)的原蟲(chóng)和其他寄生蟲(chóng)等。所以實(shí)驗室工作人員應應主動(dòng)加強涂片鏡檢工作,以提高檢驗質(zhì)量。
【參考文獻】
�。�1］過(guò)祥豹.原始標本涂片檢查對微生物檢驗全過(guò)程的導航作用.臨床檢驗雜志,2002，20，25～28.
�。�2］張卓然, 倪語(yǔ)星.臨床微生物學(xué)和微生物檢驗學(xué)［m］. 北京: 人民衛生出版社, 2003, 7: 233.
�。�3］馬翔,孫麗君,等.傳統方法在臨床細菌學(xué)中的應用［j］.中華檢驗醫學(xué)雜志,2003 ,26 :453～454.
�。�4］林嘉,劉華.85份合格痰標本涂片檢查與培養結果分析［j］.上海醫學(xué)檢驗雜志,1998,13，98～99.
�。�5］蔡文城.實(shí)用臨床微生物診斷學(xué)［m］.東南大學(xué)出版社,1998，11，71.
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