控制家畜蠕蟲(chóng)感染的照射疫苗

控制家畜蠕蟲(chóng)感染的照射疫苗 摘　要　應用照射減活的幼蟲(chóng)疫苗控制由網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)(Dictyocaulus spp)引起的牛、羊寄生蟲(chóng)性支氣管炎已有近40年的歷史，其后雖對其它的宿主-寄生蟲(chóng)系統開(kāi)展大量的研究，但并未有新的疫苗問(wèn)世。事實(shí)上，抗網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)疫苗需持續不斷的自然感染來(lái)維護其免疫力。制備活的幼蟲(chóng)疫苗的困難阻礙了這項研究的進(jìn)行，本文討論了生產(chǎn)疫苗的困難，提出一了些解決的辦法并對發(fā)展抗其它蠕蟲(chóng)的照射減活疫苗提出了建議。

　　蠕蟲(chóng)的抗藥性重新引起人們對非化學(xué)方法控制家畜感染的興趣，包括宿主的遺傳抵抗力、生物防治、放牧管理和疫苗接種等方法。將這些方法同藥正確的聯(lián)合使用，可能是防治蠕蟲(chóng)感染的最好措施。

　　疫苗可保護易感家畜或減少家畜體內的幼蟲(chóng)數，從而降低易感動(dòng)物的感染率。應用減活幼蟲(chóng)疫苗提高機體免疫力是一項值得重新研究的課題。40年前就曾開(kāi)展過(guò)這方面的研究，但現在判斷療效的標準已改變。例如，將疫苗接種同其它方法聯(lián)合應用，使得降低蟲(chóng)荷作用較低的疫苗可能被接受，強調的重點(diǎn)是降低產(chǎn)卵率，進(jìn)而能降低牧場(chǎng)的家畜再感染。如果免疫成年家畜能減少牧場(chǎng)中寄生蟲(chóng)數，降低幼畜感染疾病的機會(huì )，那么對疫苗的研究可不必再集中于更年幼的幼畜。過(guò)去曾經(jīng)認為制備減活疫苗非常困難且價(jià)格昂貴以至不能生產(chǎn)和運輸，然而，應用現有的知識，絕大多數的技術(shù)難題都能被克服。

　　1　照射減活疫苗的進(jìn)展

　　1.1　照射減適幼蟲(chóng)疫苗的商業(yè)應用

　　盡管在宿主-寄生蟲(chóng)系統開(kāi)展了大量有關(guān)減活幼蟲(chóng)疫苗的研究，并且很多系統表現出很高的保護力，但僅有3種疫苗用于商業(yè)生產(chǎn)。這種3種疫苗是：寄生于牛羊肺的胎生網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)(Dictyocaulus viviparus)疫苗，寄生于牛羊肺的絲狀網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)(Dictyocaulus filaria)疫苗和犬鉤蟲(chóng)(Ancylostoma caninum)疫苗。胎生網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)疫苗自1959年已商品化。絲狀網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)疫苗自1965年首次報道后，東歐、中區、北亞等許多國家都有生產(chǎn)。1973年美國曾生產(chǎn)犬鉤蟲(chóng)疫苗，雖然技術(shù)上取得了成功，但因為商業(yè)的原因它并未成為有利可圖的產(chǎn)品，1975年已停止生產(chǎn)。

　　1.2　肺線(xiàn)蟲(chóng)疫苗的歷史

　　自1959年開(kāi)始研究胎生網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)疫苗，之后英國格拉斯哥的研究人員對利用照射減活的幼蟲(chóng)疫苗刺激免疫力方面進(jìn)行了一系列的研究，40krad劑量的X線(xiàn)照射的幼蟲(chóng)，每次接種1000條，4周后再接種一次，對再感染能產(chǎn)生高水平的保護力。

　　二十世紀五十年代末，由網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)引起的寄生蟲(chóng)性支氣管炎對英國乳品加工業(yè)來(lái)說(shuō)是很?chē)乐氐膯?wèn)題，當時(shí)缺乏治療及預防此病的藥物，對此病的流行病學(xué)知識也不多，由于少量的蟲(chóng)荷即可引起發(fā)病，因而該病較易在短期內爆發(fā)流行而且難以控制。在這種背景下，疫苗的出現備受青睞并取得了可觀(guān)的商業(yè)效益。

　　隨后的三十年，出現了現代的抗蠕蟲(chóng)藥物，使疫苗的優(yōu)越性受到了影響。晚近，堅持利用藥物作為預防胃腸道線(xiàn)蟲(chóng)和肺線(xiàn)蟲(chóng)感染的一個(gè)組成部分也進(jìn)一步削弱了肺線(xiàn)蟲(chóng)疫苗的優(yōu)越性。有些農場(chǎng)在大部分年份里能利用藥物有效地控制家畜秋季肺線(xiàn)蟲(chóng)感染。然而，如果初冬天氣溫暖延遲家畜入室時(shí)間，仍會(huì )暴發(fā)肺線(xiàn)蟲(chóng)病。由于有效的藥物防治，動(dòng)物可能不會(huì )經(jīng)歷足夠的低水平感染以產(chǎn)生并維持免疫力，因而成年牛仍會(huì )患肺線(xiàn)蟲(chóng)病。

　　由于防治措施的有效性和病畜較過(guò)去得到了更有效的治療，導致了胎生網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)疫苗銷(xiāo)售量下降，但隨之而來(lái)是患寄生蟲(chóng)性支氣管炎的家畜尤其是成年牛增多，盡管近年來(lái)疫苗產(chǎn)品銷(xiāo)售量下降，但肺線(xiàn)蟲(chóng)疫苗仍然是最成功和最有利可圖的。

　　1.3　有前途的照射減活幼蟲(chóng)疫苗

　　自牛肺線(xiàn)蟲(chóng)疫苗取得成功后，人們對類(lèi)似的疫苗能迅速用于控制其它家畜寄生蟲(chóng)寄予很大希望，并在許多宿主-寄生蟲(chóng)系統進(jìn)行了研究，包括捻轉血矛線(xiàn)蟲(chóng)(Haemonchus contortus)、蛇形毛圓線(xiàn)蟲(chóng)(Trichostrangylus colubriformis)、尋常圓線(xiàn)蟲(chóng)(Strongylus vulgaris)、日本血吸蟲(chóng)和牛血吸蟲(chóng)。在減少蟲(chóng)荷方面，尋常圓線(xiàn)蟲(chóng)照射減活幼蟲(chóng)疫苗能使馬產(chǎn)生92％的保護力，照射減活的捻轉血矛線(xiàn)蟲(chóng)幼蟲(chóng)疫苗和毛圓線(xiàn)蟲(chóng)幼蟲(chóng)疫苗能使羊分別產(chǎn)生95％和88％以上的保護力。

　　然而，搥轉血矛線(xiàn)蟲(chóng)疫苗僅對7月齡以上的動(dòng)物產(chǎn)生較高的保護力，而且要求在疫苗接種前動(dòng)物未受到該蟲(chóng)的感染，這意味著(zhù)最易感的家畜的血矛線(xiàn)蟲(chóng)病流行區難以通過(guò)接種疫苗產(chǎn)生抵抗力。目前很少開(kāi)展疫苗對成蟲(chóng)產(chǎn)卵方面的研究，減活疫苗有可能通過(guò)降低成蟲(chóng)產(chǎn)卵率，減輕牧場(chǎng)污染，減少幼年易感動(dòng)物的感染機會(huì )。

　　2　幼蟲(chóng)疫苗的制備及傳送

　　2.1　幼蟲(chóng)的制備

　　有關(guān)照射減活幼蟲(chóng)疫苗爭論的焦點(diǎn)之一是所需幼蟲(chóng)的數目。迄今為止，體外培養幼蟲(chóng)尚未取得成功，仍需保存感染的動(dòng)物(對吸蟲(chóng)還需保存螺類(lèi)中間宿主)來(lái)制備幼蟲(chóng)。

　　對捻轉血矛線(xiàn)蟲(chóng)，每次接種10000條幼蟲(chóng)(假設每只動(dòng)物接種2次，則需2000條幼蟲(chóng))。假定人工感染捻轉血矛線(xiàn)蟲(chóng)的羊每天產(chǎn)糞750克，每克糞便含2500個(gè)蟲(chóng)卵，蟲(chóng)卵孵化率為60％，那么每圈10只羊，每月一圈，一年所提供的幼蟲(chóng)足夠接種200000頭羊，此項費用并不太昂貴，也不需很高的技術(shù)。

　　幼蟲(chóng)培養和制備方法會(huì )影響疫苗的保存期。采用普通方法生產(chǎn)犬鉤蟲(chóng)幼蟲(chóng)時(shí)，幼蟲(chóng)僅能存活2－4周，如果采用無(wú)菌培養技術(shù)，幼蟲(chóng)可存活12個(gè)月。值得一提的是，從糞便中分離的絲狀網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)的1期幼蟲(chóng)在水中培養到3期幼蟲(chóng)，這種疫苗的保存期僅為2周，而胎生網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)幼蟲(chóng)在糞便中培養到3期幼蟲(chóng)，這種疫苗的保存期可達到6周。目前尚不清楚這種現象是蟲(chóng)種的不同還是培養方法的差異造成的。

　　2.2　照射減活

　　對準備好的幼蟲(chóng)，需尋找合適的減活方法，近年來(lái)照射減活成為關(guān)注的焦點(diǎn)，其它方法如化學(xué)減活和基因調控法也是可能和值得研究的。文獻中曾報道過(guò)3種照射減活方法：X射線(xiàn)法，γ射線(xiàn)法及紫外線(xiàn)法。早期牛肺線(xiàn)蟲(chóng)疫苗采用X射線(xiàn)照射減活，然而近年來(lái)γ射線(xiàn)法因為更方便而被大多數學(xué)者采用。紫外線(xiàn)照射已作為一種激活方法用于許多寄生蟲(chóng)疫苗的研究。

　　不同的學(xué)者采用的照射劑量不同，但40－60kard劑量是公認的制備線(xiàn)蟲(chóng)疫苗的有效劑量。溫度和幼蟲(chóng)密度的稍許改變對減活的效果也會(huì )產(chǎn)生很大的影響。

　　2.3　接種途徑

　　通常采用自然感染途徑接種照射過(guò)的幼蟲(chóng)，改用其它途徑也可能有效。例如，給�？诜�胎生網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)疫苗，與對照組相比，減蟲(chóng)率為96.6％，同樣劑量采用皮下包埋法減蟲(chóng)率為97.8％。

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