淺談酶聯(lián)免疫吸附試驗實(shí)驗教學(xué)思考的分析論文
【摘要】酶聯(lián)免疫吸附試驗是廣泛應用于臨床檢驗診斷的免疫學(xué)檢驗技術(shù)，實(shí)驗教學(xué)中采用該技術(shù)檢測“乙肝兩對半”。為適應中職生教育人才培養模式的教學(xué)改革，使學(xué)生符合具有“理論知識適度、技術(shù)應用能力強”的要求，我們對實(shí)驗教學(xué)內容和方法進(jìn)行改革，從適用性角度選題，通過(guò)實(shí)驗操作考核，采取以考促學(xué)的手段，加強酶聯(lián)免疫吸附試驗的訓練力度，提高學(xué)生實(shí)驗操作能力，培養學(xué)生獨立工作的能力。
【關(guān)鍵詞】酶聯(lián)免疫吸附試驗；免疫學(xué)檢驗；實(shí)驗；考核
酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme－linkedimmunosorbentassay，ELISA)是廣泛應用于臨床檢驗診斷的免疫學(xué)檢驗技術(shù)。該技術(shù)集基本理論、基本技能為一體，能使學(xué)生能對前期所學(xué)的理論知識及技能進(jìn)一步加強和提高，是一個(gè)能為學(xué)生進(jìn)人臨床實(shí)習打好基礎的系統實(shí)訓。目前該技術(shù)的臨床檢測多采用商品化的ELISA試劑盒，實(shí)驗步驟較少，操作簡(jiǎn)單。然而，參與反應的成分很多，如抗原抗體濃度、酶結合物濃度以及試劑的質(zhì)量控制等等，影響因素眾多。傳統的實(shí)驗教學(xué)中，實(shí)驗材料的準備、儀器的準備及調試、標本及試劑的處理等工作基本上是由教師包辦。實(shí)驗的許多環(huán)節學(xué)生沒(méi)有親自做，因而在實(shí)驗完成后，部分學(xué)生對實(shí)驗還是一知半解，更談不上能力的鍛煉和培養［1］。為適應中職生教育人才培養模式的教學(xué)改革，使學(xué)生符合具有“理論知識適度、技術(shù)應用能力強”的要求，對免疫學(xué)檢驗實(shí)驗教學(xué)內容和方法進(jìn)行改革勢在必行。為此我們通過(guò)實(shí)驗技能操作考核，采取以考促學(xué)的手段，加強了酶聯(lián)免疫吸附試驗內容的訓練力度，也收到了一定的效果，以下談?wù)勎覀兊淖龇靶Ч?/p>
1精選考核內容，以適應臨床實(shí)踐的需要
考核內容的選擇上以圍繞臨床實(shí)際進(jìn)行選擇，真正使學(xué)生做到學(xué)以致用。不但要讓學(xué)生了解、掌握先進(jìn)的免疫學(xué)檢驗技術(shù)和操作方法，還必須著(zhù)重培養學(xué)生的創(chuàng )造性思維和綜合分析問(wèn)題的能力，從而全面提高學(xué)生素質(zhì)［2］。ELISA由于操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、可定性定量，在臨床檢驗診斷中應用最為廣泛。常用于如病毒性肝炎、艾滋病、皰疹等傳染性疾病的檢測診斷，還常用于補體、免疫球蛋白和腫瘤標志物的檢測。要想在有限的課時(shí)里完成諸多的內容訓練，顯然是不現實(shí)的。因此我們僅選擇了最具有代表性的“乙肝兩對半”檢測作為該技術(shù)的訓練及考核內容�！耙腋蝺蓪Π搿惫灿形屙棛z測項目，即HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb，實(shí)驗中所需要的實(shí)驗器材均能由檢驗實(shí)驗室提供，易于準備，給學(xué)生提供了選擇和發(fā)揮的空間。實(shí)驗過(guò)程中所需要的待測血清標本為陽(yáng)性或陰性標準物，不具傳染性，保證了學(xué)生實(shí)驗的安全性。學(xué)生只要掌握了“乙肝兩對半”的檢驗程序和檢驗方法，其他在臨床上需要用ELISA技術(shù)檢測的常見(jiàn)項目則觸類(lèi)旁通，能起到事半功倍的效果，至于少見(jiàn)的、較為復雜的檢測項目可以在日后的實(shí)習及工作中繼續學(xué)習。
2調整考核內容，可行性及針對性強
酶聯(lián)免疫吸附試驗教學(xué)內容在學(xué)時(shí)安排上有6課時(shí)，理論與實(shí)驗課課時(shí)之比為1．1。以往的教學(xué)形式為先理論授課，教師講解實(shí)驗的原理及檢驗程序，實(shí)驗教學(xué)中教師講解后進(jìn)行示范教學(xué)，學(xué)生照葫蘆畫(huà)瓢的再做實(shí)驗;實(shí)驗操作考核只設HBsAg項目的考核，考核項目單一、形式單一。學(xué)生只需完成實(shí)驗操作，報告結果即可。而現行的考核內容是“乙肝兩對半”的共五項檢測項目，各個(gè)項目的檢驗過(guò)程如標本的稀釋、試劑選擇、加樣順序有所不一。從限制考核時(shí)間的角度考慮，學(xué)生在考核時(shí)隨機抽考其中的一個(gè)項目，由考生自主選擇所需物品進(jìn)行實(shí)驗操作，這樣增加了考試的隨機性和靈活性。雖然抽考使得考核難度增加，但能強化學(xué)生對ELISA檢測乙肝兩對半操作步驟的理解。當學(xué)生抽到題目后，在熟悉操作步驟的基礎上，只要懂得該項目檢測時(shí)需注意的細節，如檢測HBcAb需將血清稀釋50倍，HBeAb的檢測需加入中和試劑，學(xué)生在對離心機、水浴箱及微量移液器的使用相當熟悉的基礎上，不難將標本中的結果如實(shí)地檢測出來(lái)。
3考核的形式
學(xué)生重理論、輕實(shí)驗的現象普遍存在，有的學(xué)生每操作一步就看一下筆記，或者是詢(xún)問(wèn)其他同學(xué)，有的學(xué)生甚至希望教師能一步步的教，因而學(xué)生對酶聯(lián)免疫吸附試驗缺乏系統的認知。我們將考核的形式設計有理論測試(占30分)和操作考核(占70分)。通過(guò)調整考核內容，將能力培養貫穿于整個(gè)訓練過(guò)程，將單純理論教學(xué)融合于實(shí)驗教學(xué)中，能把理論知識激活，也強化了學(xué)生的實(shí)驗操作能力及解決問(wèn)題、分析問(wèn)題能力。理論測試采用本教研室的計算機交互平臺進(jìn)行，根據教學(xué)內容特點(diǎn)，理論測試我們進(jìn)行這樣的設計，首先收集乙肝兩對半檢測相關(guān)試題，建立題庫，內容涉及實(shí)驗原理、操作、材料、結果觀(guān)察及臨床意義。如(1)乙肝兩對半檢測涉及ELISA的哪些原理?分別檢測什么項目?(2)通過(guò)各反應孔顯色，判斷疫苗接種者、病毒攜帶者、“大三陽(yáng)”、“小三陽(yáng)”;(3)手工洗滌有何要求;(4)加終止液的目的是什么;(5)ELISA常用的酶是哪種?其底物是什么。共組10套試題，學(xué)生抽簽后通過(guò)計算機交互平臺指向性地發(fā)布試題、進(jìn)行考試�？紤]到學(xué)生對理論考試容易產(chǎn)生畏難情緒，在題型的設計上，設有填充題，標示題、連線(xiàn)題及填空題等，內容直觀(guān)、清晰，學(xué)生“寓考于樂(lè )”，在輕松愉快的心理環(huán)境下地完成理論測試。
4考試評分嚴謹，設計合理
理論考核從試題集中抽取出6道題組卷，每題5分，共30分。操作考核的評分項目包括:專(zhuān)業(yè)素質(zhì)(衣著(zhù)儀表、考試態(tài)度、紀律)5分;實(shí)驗準備(實(shí)驗用品、試劑的預處理、標本處理、標記記錄)5分;實(shí)驗步驟(加樣、微量移液器的使用、孵育、洗滌、顯色)35分，結果觀(guān)察10分;操作后清場(chǎng)(試劑、器材歸位、實(shí)驗臺面清理)5分，綜合評價(jià)(規定時(shí)間完成、實(shí)驗后清場(chǎng)、消毒等)10分，共70分。評分標準于考試前告知學(xué)生，給學(xué)生能充分地復習和準備，注意操作細節，提高考試質(zhì)量�？荚嚂r(shí)每個(gè)學(xué)生獨立完成試驗，教師全程監考，及時(shí)對出錯環(huán)節扣分，評出總分。
5效果分析
在酶聯(lián)免疫吸附試驗的實(shí)驗教學(xué)中，采用考核方式，取得了以下成效。
5．1利于調動(dòng)學(xué)生的主觀(guān)能動(dòng)性，激發(fā)起學(xué)習的熱情
實(shí)驗操作考核綜合反映出學(xué)生的實(shí)驗預習、實(shí)驗過(guò)程和實(shí)驗態(tài)度等各方面的表現�？己顺煽�(jì)占期末總成績(jì)的30%，將學(xué)生實(shí)驗考核計入課程總成績(jì)后，學(xué)生上實(shí)驗課的目的性增強，課上都搶著(zhù)做實(shí)驗，從以往實(shí)驗缺乏主動(dòng)性，不預習，不復習，變?yōu)榉e極思考，認真準備。實(shí)驗報告抄襲現象也明顯減少，改變了重理論輕實(shí)踐的現象［3］。從學(xué)生提出的問(wèn)題，如溶血標本可以檢測“乙肝兩對半”嗎?如果用溶血標本檢測，會(huì )有什么影響，會(huì )影響什么試劑?從這些問(wèn)題的提出可以看出，學(xué)生懂得對實(shí)驗進(jìn)行思考，也懂得遇到問(wèn)題主動(dòng)和老師商量，學(xué)生不斷發(fā)現問(wèn)題、思考問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力得到提高。
5．2獨立工作能力的培養
獨立工作能力是一個(gè)醫學(xué)檢驗工作者最基本素質(zhì)，中職生畢業(yè)后就業(yè)單位多是基層醫院，基層醫院的檢驗科可能只有1至2名檢驗員，每天的檢驗工作任務(wù)都要獨立完成。因而學(xué)生在就學(xué)期間即應注重獨立工作能力培養。在實(shí)驗考核過(guò)程中，實(shí)驗物品的選擇、擺放，實(shí)驗結束后操作臺的清理等，是學(xué)生自己準備和獨立完成。學(xué)生在考核時(shí)需考慮到考核時(shí)間的限制，因此只有熟悉基本的理論知識、熟練基本操作，才能在規定時(shí)間內完成實(shí)驗，得出正確的結果，考試前不做好準備實(shí)驗將無(wú)法順利完成。
5．3實(shí)驗基本技能的訓練
由于酶聯(lián)免疫吸附試驗涉及環(huán)節多，通過(guò)考試能綜合考核學(xué)生的基本實(shí)驗技術(shù)，如移液管的準確吸樣，血清等倍稀釋的方法;能考察學(xué)生對常用儀器設備如離心機、恒溫孵育箱、酶標儀、洗板機的操作;在對血清標本進(jìn)行檢測時(shí)，使用過(guò)的物品如棉簽、試管、注射器的正確處置，能增強學(xué)生的無(wú)菌操作技術(shù)和觀(guān)念。
5．4學(xué)生的評價(jià)及反饋
此考核方案在兩屆學(xué)生進(jìn)行了實(shí)施，通過(guò)操作考核，學(xué)生們得到較為系統的訓練，對ELISA檢測乙肝兩對半的整個(gè)流程有了較為深刻的認識。有必要開(kāi)展，通過(guò)考核能更好地將理論與實(shí)踐相結合，學(xué)生能自如地、成功地檢測出標準物血清標本的正確結果，同時(shí)也很有成就感，增強了對實(shí)習及將來(lái)的工作的信心。在對2013級的學(xué)生進(jìn)行實(shí)習情況跟蹤、訪(fǎng)談中得知，學(xué)生普遍認為，ELISA技術(shù)在臨床免疫檢驗診斷中應用廣泛，用此技術(shù)檢測的項目多，工作量較大。由于在操作考核強化了技能，在實(shí)習老師的指導下，能很快地進(jìn)入角色，增強了工作自信心。對學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗考核的同時(shí)，也對教師提出了更高要求。教師準備的理論測試問(wèn)題在內容上需與臨床免疫檢驗接軌，使考核更科學(xué)合理化。規范實(shí)驗教學(xué)，嚴謹、規范示作好示教。學(xué)生操作過(guò)程中，巡視督查，及時(shí)糾正學(xué)生的錯誤。以考促學(xué)法強化酶聯(lián)免疫吸附試驗的實(shí)驗教學(xué)，補充和完善了免疫學(xué)檢驗實(shí)驗教學(xué)的內容和方法，也希望能以此提高學(xué)生對其他課程學(xué)習的主動(dòng)性及激發(fā)起學(xué)習的熱情。
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